Millicell ERS-3.0 數(shù)字細胞電阻儀在藥物研發(fā)領域有著廣泛的應用，以下為您介紹一些成功案例：

一,、黃諾馬苷在 MDCK 單層細胞模型上的轉運機制分析

研究目的：研究黃諾馬苷在馬丁達比犬腎上皮（MDCK）單層細胞模型上的吸收轉運特性,。

實驗方法：利用噻唑藍（MTT）比色法考察黃諾馬苷對 MDCK 細胞的毒性,，使用 Millicell-ERS-2 型細胞電阻儀檢測 MDCK 單層細胞模型的電阻值,，考察黃諾馬苷的質量濃度,、給藥時間以及鈉 - 葡萄糖協(xié)同轉運蛋白（SGLTs）抑制劑和葡萄糖轉運蛋白 2（GLUT2）抑制劑對其跨膜轉運的影響，采用 UPLC-MS/MS 測定黃諾馬苷的含量,，計算表觀滲透系數(shù)（Papp）及外排比（ER）,。

研究結果：黃諾馬苷質量濃度為 5.625 - 120mg?L-1 時對 MDCK 細胞無明顯毒性作用，黃諾馬苷在 MDCK 單層細胞模型上的轉運具有時間,、濃度依賴性,，且 Papp 基本處于 1×10-6 - 10×10-6cm?s-1。在 60min 和 90min 時,，與空白組相比,，根皮苷組中黃諾馬苷在 MDCK 單層細胞模型上的轉運量減少。結論為黃諾馬苷在腸道中屬于中等吸收的藥物,，其跨膜轉運機制以被動轉運為主,，兼有主動轉運存在，且 SGLTs 轉運體可能參與介導了黃諾馬苷在 MDCK 單層細胞模型上的轉運,。

二,、血腦 / 血瘤屏障體外模型的構建、形態(tài)與功能特性

研究目的：構建并觀測血腦 / 血瘤屏障體外模型的形態(tài)與功能特性,，為中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物跨血腦和（或）血瘤屏障研究提供體外實驗模型,。

實驗方法：將分離的 Balb/C 小鼠腦微血管內皮細胞（BMEC）在鋪有明膠的微孔膜上單層培養(yǎng)或與大鼠膠質瘤細胞 C6 雙室共培養(yǎng)，分別建立血腦屏障（BBB）和血瘤屏障（BTB）模型,，采用光鏡和掃描電鏡觀察 BMEC 形態(tài),，采用 Millicell-ERS 系統(tǒng)檢測屏障中的跨內皮電阻（TEERs），免疫細胞化學檢測 P - 糖蛋白（P-gp）表達,，并比較 BBB 和 BTB 中 BMEC 的形態(tài)和功能特征,。

研究結果：兩組模型中的 BMEC 均形成單層生長和良好的細胞間緊密連接，產生較高的 TEERs 值,，并檢測到 P-gp 表達,。瘤細胞誘導使 BMEC 間出現(xiàn)間隙，同時相點 TEERs 值降低,，P-gp 表達減弱,。結論為兩種體外模型可用于研究藥物跨血腦和（或）血瘤屏障特性，其中 BTB 模型可能更適合抗腫瘤藥物的研究,。

三,、腸道微生物對 Caco-2 腸上皮細胞單層屏障作用的機制研究

研究目的：利用 Caco-2 腸上皮細胞單層屏障模型研究四種腸道微生物對腸道屏障的影響。

實驗方法：建立 Caco-2 腸上皮細胞單層屏障模型,，堿性磷酸酶檢測細胞極性,。將實驗分為空白對照組,、大腸埃希菌組、肺炎克雷伯菌組,、糞腸球菌組,、乳酸桿菌組，在各組細菌作用下,，Millicell-ERS 電阻測定儀測定 Caco-2 腸上皮細胞單層跨上皮細胞電阻 TEER 值變化,、酶標儀檢測熒光黃通過率的變化；酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測單層細胞 zonulin,；電鏡觀察細胞間緊密連接超微結構變化,；免疫熒光、Western blot 方法檢測緊密連接（TJ）相關蛋白 Occludin,、Claudin-1,、ZO-1 表達、分布和超微結構變化,。

研究結果：堿性磷酸酶測定細胞單層呈極性,，TEER 值穩(wěn)定在 250 ㎝2，建模成功,；腸道大腸埃希菌,、肺炎克雷伯菌、糞腸球菌均引起細胞單層屏障通透性升高,，TEER 值明顯下降,，熒光黃透過率增高，與對照組相比較差異顯著,；大腸埃希菌,、肺炎克雷伯菌作用后細胞釋放 zonulin 蛋白增加，與對照組相比有統(tǒng)計學差異,，糞腸球菌作用于 Caco-2 細胞單層后，zonulin 釋放量較對照組升高,，但差異無統(tǒng)計學意義,，乳酸桿菌組 zonulin 釋放量與對照組無顯著差異；大腸埃希菌與單層細胞作用 6 小時后透射電子顯微鏡觀察單層細胞屏障可見細胞表面微絨毛變稀,，絨毛有脫落,，細胞間緊密連接電子密度降低，斷裂,，間隙增寬,；大腸埃希菌組、肺炎克雷伯菌組三種緊密連接蛋白 Occludin,、Claudin-1,、ZO-1 表達明顯減少,。糞腸球菌組、乳酸菌組 Occludin,、Claudin-1 表達與空白對照組相比無明顯變化,，胞漿蛋白 ZO-1 表達降低。細菌作用 6 小時后免疫熒光觀察緊密連接蛋白分布情況,，大腸埃希菌組和肺炎克雷伯菌組可見熒光較正常組松散,，不連續(xù)，可見明顯鋸齒狀分布,，甚至缺口及裂隙樣表現(xiàn),，熒光強度減弱，糞腸球菌組,、乳酸菌組熒光強度稍減弱,，但仍沿胞膜分布，條帶較清晰,，與空白對照組差異不明顯,。

四、烏司他丁對腸道上皮細胞屏障損傷的保護作用分析

研究目的：探討烏司他?。?/span>UTI）對腸道上皮細胞屏障損傷的保護作用及其機制,。

實驗方法：培養(yǎng) Caco-2 細胞，并建立腫瘤壞死因子 α（TNF-α）誘導的單層上皮細胞模型,，隨機分為空白對照組,、TNF-α 模型組、UTI 低劑量組（5 萬 U/kg）,、UTI 中劑量組（10 萬 U/kg）,、UTI 高劑量組（20 萬 U/kg）。采用 Millicell 電阻儀和多功能讀板儀分別測定各組上皮細胞電阻（TER）和異硫氰酸熒光素標記的葡聚糖（FITC-dextran）,，酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）測定白細胞介素 6（IL-6）,、IL-10 水平，流式細胞儀測定細胞凋亡率,，免疫蛋白質印記（Western blot）技術測定緊密連接蛋白閉合蛋白（occludin）和緊密黏連蛋白 1（ZO-1）表達水平,。

研究結果：與空白對照組相比，TNF-α 模型組 TER,、FITC-dextran,、occludin 和 ZO-1 表達水平均明顯下降，IL-6,、IL-10,、細胞凋亡率明顯升高；與 TNF-α 模型組比較，經(jīng) UTI 處理后,，TER,、FITC-dextran、occludin 和 ZO-1 表達水平升高,，IL-6,、IL-10、細胞凋亡率降低,，其中以 UTI 高劑量組變化為主,。

五、十溴聯(lián)苯醚對血腦屏障體外模型通透性的影響

研究目的：觀察十溴聯(lián)苯醚（BDE-209）對血腦屏障體外模型通透性的影響,。

實驗方法：利用小鼠腦微血管內皮細胞 bEnd.3 與星形膠質細胞構建非接觸共培養(yǎng)血腦屏障體外模型,，ERS 電阻儀測定跨內皮細胞電阻值（TEER）確定建模成功，采用 CCK-8 法檢測 bEnd.3 細胞活性并確定 50μmol/L 為 BDE-209 最大劑量,；將 0,、10、25,、50μmol/L 的 BDE-209 作用于血腦屏障體外模型中的 bEnd.3 細胞 24h,，采用 ERS 電阻儀測定 TEER，HRP 滲透實驗評價模型大分子物質通透性,，免疫印跡法檢測 bEnd.3 細胞緊密連接蛋白 occludin 表達,。

研究結果：隨著 BDE-209 濃度增加，TEER 逐漸下降,，HRP 滲透逐漸增多,，bEnd.3 細胞 occludin 蛋白表達量逐漸降低。結論為 BDE-209 可致血腦屏障體外模型 TEER 降低,，HRP 滲透增高,，occludin 蛋白表達減少，血腦屏障的完整性破壞,。

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