誘導(dǎo)多能干細(xì)胞克隆效率低,?單細(xì)胞分選系統(tǒng)幫您搞定,分離效率高達(dá)100%,!
人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(hiPSCs)是一類可用于疾病建模,、藥物開發(fā)和組織工程領(lǐng)域的多能誘導(dǎo)干細(xì)胞,。與CRISPR-Cas9等功能強(qiáng)大的基因編輯技術(shù)結(jié)合后,可根據(jù)不同患者的特性進(jìn)行疾病相關(guān)遺傳變異的研究和識別,。
然而,,培養(yǎng)hiPSCs的步驟較為繁瑣,細(xì)胞對異常的處理和操作非常敏感,,任何操作的問題都有可能導(dǎo)致細(xì)胞和遺傳毒性應(yīng)激的積累,,進(jìn)而導(dǎo)致不良分化和多能性喪失?;蚓庉嫿渭?xì)胞衍生的hiPSC克隆過程中常用的技術(shù)往往過于復(fù)雜或粗暴,,導(dǎo)致單細(xì)胞克隆效率低下。此外,,它們在確保衍生培養(yǎng)物單克隆性方面存在局限性,。為此,英國iotaSciences公司推出了可實現(xiàn)100%單細(xì)胞分離的isoPick單細(xì)胞可視化分選系統(tǒng),,有效解決了培養(yǎng)hiPSCs單克隆過程中的困難,。

如右上圖所示,單細(xì)胞可視化分選系統(tǒng)isoPick采用納升級的網(wǎng)格式單細(xì)胞腔室技術(shù)(GRID技術(shù)),,可實現(xiàn)高通量,、高自動化的單細(xì)胞可視化分選;確保分選所得的單細(xì)胞樣品中只有一個單細(xì)胞,,結(jié)果可驗證,、可追蹤;分選過程非常溫和,,能夠確保更高的單細(xì)胞存活率,,達(dá)到更佳的克隆生長效果。單細(xì)胞可視化分選系統(tǒng)isoPick可全自動進(jìn)行單細(xì)胞的分選,、拾取并轉(zhuǎn)移1.5 µl至200 µl的液體至PCR管或96孔板中,。

使用isoPick從GRIDs內(nèi)分選hiPSC單細(xì)胞置于Laminin-521,Vitronectin-N, Synthemax和iMatrix (Laminin-511)4種不同基質(zhì)且含有培養(yǎng)基的96孔板中。以第7-10天內(nèi)的時間計算得出的單細(xì)胞克隆效率可以發(fā)現(xiàn),,無論使用的包被基質(zhì)或hiPSC細(xì)胞系,,平均克隆效率均>70%(上圖),明顯高于其他通常使用的方法(包括FACS),,表明isoPick對敏感單細(xì)胞的溫和處理,,能夠確保細(xì)胞的高存活率和更好的克隆生長效果。
isoPick使用戶能夠以快速,、高效,、自動化的方式從多樣、異質(zhì)的細(xì)胞群體中分離單個細(xì)胞,。GRID腔室非常適合用于觀察和記錄單個細(xì)胞的分離過程,。 用戶可將單個細(xì)胞分離并直接置入96孔板用于細(xì)胞克隆,。相比傳統(tǒng)方法,這種方法用簡單的線性工作流程,,顯著提高了細(xì)胞分離與克隆效率,,操作流程高度自動化,可以將樣品無縫銜接單細(xì)胞組學(xué)的后續(xù)操作,。
單細(xì)胞可視化分選系統(tǒng)的優(yōu)勢:
● 全自動化流程
● 操作非常簡單 對細(xì)胞無損傷
● 結(jié)果可追蹤
● 分離效率高達(dá)100%
● 直接轉(zhuǎn)移到PCR管或96孔板
● 結(jié)構(gòu)緊湊,,體積小巧
文獻(xiàn)舉例:
單細(xì)胞可視化分選系統(tǒng)相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)表于Cell、Advanced Science,、Small Methods,、Nature Communications 等期刊,如下摘引了近年三篇具有代表性的文獻(xiàn)和大家分享,。
● Soitu C, Stovall‐Kurtz N, Deroy C, et al. Jet‐Printing Microfluidic Devices on Demand[J]. Advanced Science, 2020, 7(23): 2001854.
● Gangoso E, Southgate B, Bradley L, et al. Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[J]. Cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.
● Deroy C, Nebuloni F, Cook P R, et al. Microfluidics on Standard Petri Dishes for Bioscientists[J]. Small Methods, 2021, 5(11): 2100724.
● Deroy C, Wheeler J H R, Rumianek A N, et al. Reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.
● Oliveira N M, Wheeler J H R, Deroy C, et al. Suicidal chemotaxis in bacteria[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7608.
樣機(jī)體驗:
為更好地服務(wù)中國科研工作者,,Quantum Design 中國引進(jìn)了單細(xì)胞可視化分選系統(tǒng)-isoPick樣機(jī),將為大家提供為專業(yè)的售前,、銷售、售后技術(shù)支持,,歡迎各位老師參觀試用,!
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