胎牛血清（FBS）的基礎知識與提取方法,！

一,、什么是胎牛血清（FBS）,？

胎牛血清（FBS）是指通過封閉的采集系統(tǒng)從牛胎兒的血液中提取的血清。血清又是什么呢,？血清是血液自然凝結后剩下的琥珀色血液部分,；通常通過離心進一步精制，以去除殘留的血細胞,。不含血細胞,、纖維蛋白及凝集因子等，含有多種對細胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質,。

二,、胎牛血清可以用在哪里？

胎牛血清（FBS）用作真核細胞體外細胞培養(yǎng)的生長補充劑 ,。動物血清（牛血清和其它動物血清）都用于細胞培養(yǎng),，其中使用泛的是胎牛血清（FBS）。 FBS含有生長因子和極低水平的抗體,，因此在許多不同的細胞培養(yǎng)應用中具有多功能性,。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分，包括蛋白質,，電解質,，脂質,，碳水化合物，激素,，酶和其他不確定的成分,，這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細胞生長都是必需的。

制造環(huán)境中的學術和工業(yè)研究人員以及科學家都在其細胞培養(yǎng)基中使用胎牛血清（FBS）進行調查,，包括生物技術研究/生產(chǎn),，疫苗制造，克隆和動物診斷,。

胎牛血清能夠用在人獸疫苗及生物技術藥物的科研,、工業(yè)生產(chǎn)和質量控制領域。胎牛血清通常用于人源細胞系和原代細胞培養(yǎng),。

三,、胎牛血清的優(yōu)點是什么？

與其它類型血清相比,，胚胎期動物血清含有更多的生長因子,，及較少的gamma球蛋白含量。此外,，跟新生動物血清和成體動物血清相比,，胚胎期血清含有更低濃度的補體。補體具有溶解細胞的副作用,，還會干擾免疫檢測,。

四、胎牛血清的來源地是哪里,？

胎牛血清的主要來源地就是那些大量養(yǎng)牛的國家,，包括美國、澳大利亞,、新西蘭,、加拿大及南美和中美洲地區(qū)，由政府機構管理血清制品的生產(chǎn)及收集過程,。 胎牛血清分為美國（USDA）級和歐盟級。其中,，美國級胎牛血清沒有瘋牛?。˙SE）及口蹄疫（FMD）污染，能夠出口到任何國家,，而歐盟級胎牛血清只在大部分歐洲國家及亞洲國家銷售,。

五、如何保存胎牛血清,？

胎牛血清一般是在-5°到-20°之間凍存,，2°到8°之間融化,。一個比較好的辦法是，將胎牛血清分裝到50ml管中,，這樣做就避免了反復凍融對血清造成的危害,。偶爾一些試管等分的血清在冷凍溫度下保持液態(tài)。 這是由于缺少成核中心,，就是一些引發(fā)結晶（冷凍）的顆粒物質,。只需用手指輕彈管子，它們就會立即固化,。 血清融化后常出現(xiàn)沉淀,，可能是血清蛋白變性造成的。簡短離心即可除去沉淀,，并且,，這些沉淀一般不會影響血清質量的。

六,、胎牛血清的提取方法和流程

胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛,，胎牛血清是高的，因為胎牛還未接觸外界,，血清中所含的抗體,、補體等對細胞有害的成分最少。現(xiàn)有的胎牛血清制備工藝復雜,、成本高,，且純度低，不利于體外細胞培養(yǎng),。

1)將懷孕9個月的母牛進行剖腹產(chǎn),，產(chǎn)前采用側臥，剖腹產(chǎn)前進行局部麻醉,；

2)手術切口位置選擇在左腋窩腹壁的五分之二處,，切口長為30cm；

3)胎牛拉出子宮后,在潔凈室的層流罩下對胎牛進行心臟穿刺采血,，心臟穿刺采血時采用消毒后的采血針,，采血部位為胎牛的心臟，采血后立即將采集的血液輸入帶蓋瓶體,，帶蓋瓶體的瓶蓋中部具有用于采血針穿過的小孔,，待將采集的血液輸入瓶體后，將帶有采血針孔的瓶蓋更換為密封瓶蓋,；

4)將步驟3)中的帶蓋瓶體放入冷凍離心機中,，以3800轉/分的轉速離心35分鐘，析出的血清收集進已經(jīng)過殺菌的容器內(nèi)進行保存,；

5)將步驟4)中的血清在凈化車間進行解凍,，解凍溫度為恒溫27°,；

6)對步驟5)中化開的血清進行過濾，從上到下依次三層微孔過濾膜進行3次過濾,，過濾孔徑依次為0.1μm,。即得胎牛血清。

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