EdU系列熒光檢測產(chǎn)品

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想做細胞增殖,、細胞成像、流式分析,、細胞示蹤,、DNA損傷修復(fù)、病毒增殖活性檢測觀察怎么辦,？ 

免疫法,、染料法、同位素法……
免疫法的抗體太貴,、染料法染色不清晰,、同位素法太危險……

小翊來幫您，全新EdU系列熒光探針,，點亮你的視野,，讓你看的更清晰！

>>>背景介紹
測定DNA合成情況是細胞增殖,、細胞周期,、細胞毒性、DNA復(fù)制及修復(fù)、信號通路等研究方向常用方法之一,，用到的檢測試劑主要是胸腺嘧啶核苷酸類似物（BrdU,、EdU），兩種試劑在檢測方面有一些不同之處,。BrdU免疫檢測需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,，而EdU因為其*的炔羥基團可以與一些熒光染料發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)，無需變形,，從而將細胞標記上熒光,，因此應(yīng)用更廣泛。
 
EdU 檢測增殖細胞的特點及原理
EdU（５‐ethynyl‐２′‐deoxyuridine,，５‐乙.炔基‐２′脫氧尿嘧啶核苷）也是一種胸腺嘧啶核苷的類似物,，其化學(xué)結(jié)構(gòu)特點是脫氧胸腺嘧啶環(huán)上與５位C原子相連的甲基被乙.炔基取代，在S期細胞增殖時可作為底物摻入到正在復(fù)制的DNA鏈中,。
EdU在細胞增殖時能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,，基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以有效地檢測處于S期的細胞百分數(shù)。熒光染料可以同EdU發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)（點擊法）,，從而將增殖的細胞標記上熒光,。可用于細胞成像,、流式,、細胞示蹤、DNA損傷修復(fù)檢測,、線粒體活性檢測以及病毒增殖活性檢測等,，EdU亦適用于活體注射，穩(wěn)定,，對活體*,。
與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比，EdU檢測法更簡單,、更快速,、更準確，不需要嚴格的樣品變性(酸解,、熱解,、酶解)處理，有效地避免了樣品損傷,，有助于在組織,、器官的整體水平上觀測細胞增殖的情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度,。

圖1：EdU滲入DNA分子過程

>>>什么是“點擊法”
基于EdU的點擊法標記技術(shù)是由銅催化的疊氮化物-炔烴環(huán)加成反應(yīng)（圖2）,，將其應(yīng)用于細胞的原位標記需兩步過程,。首先，其中一個生物反應(yīng)配體是由疊氮化物或炔烴與“構(gòu)件”（如核苷酸,，核苷,，氨基酸，單糖或脂肪酸）連接構(gòu)成,；隨后將另一是由熒光染料,、生物素或其他檢測試劑連接的互補炔烴或疊氮化物構(gòu)成的反應(yīng)配體在催化劑銅的存在條件下“點擊”到位,，完成反應(yīng)
點擊化學(xué)與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測法不同,，EdU點擊檢測法不是基于抗體，無需DNA變性即可檢測摻入的核苷,。EdU點擊檢測法可以與R-PE,、GFP等熒光蛋白復(fù)用提力，該技術(shù)的優(yōu)勢在于化學(xué)方面*的小分子和低背景的標記物以及檢測基團之間特異性共價反應(yīng),。小分子的疊氮化物試劑可以有效地接觸DNA而無需對細胞進行破壞處理,。進而簡化了測定流程并且獲得的結(jié)果與使用傳統(tǒng)的BrdU相似或更好

圖2：Click-iT EdU點擊法檢測核酸過程

>>>EdU系列產(chǎn)品特點
熒光染料可以在銅離子催化下同EdU發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)，將增細胞標記上相關(guān)的熒光,?？捎糜诩毎上瘛⒘魇?、細胞示蹤,、DNA損傷修復(fù)檢測以及病毒增殖活性檢測等，EdU亦適用于活體注射,，穩(wěn)定,，對活體*。

EdU檢測的優(yōu)點：

• — 僅需EdU孵育,；細胞固定化,；熒光檢測三步；
• — 不到3h完成檢測,；
• — 標記率高且無需變性,，更好地保護細胞形態(tài)；
• — 允許與多種抗體,、熒光染料同時標記,；
• — 細胞成像、流式,、細胞示蹤,、DNA損傷修復(fù)檢測、病毒增殖活性檢測等,。

>>>EdU系列產(chǎn)品檢測結(jié)果
1,、Click-iT EdU熒光成像觀察（綠色、紅色、遠紅色）

         

2,、Click-iT EdU流式細胞儀觀察（綠色,、紅色、遠紅色）



>>>相關(guān)產(chǎn)品

參考資料
1. Chehrehasa F, Meedeniya AC, Dwyer P, Abrahamsen G, Mackay-Sim A. EdU, a new thymidine analogue for labelling proliferating cells in the nervous system. J. Neurosci. Methods. February 2009, 177 (1): 122–30. PMID 18996411. doi:10.1016/j.jneumeth.2008.10.006.
2.Cavanagh, Brenton; Walker, T. Norazit, A. Meedeniya, A. C. Thymidine analogues for tracking DNA synthesis.. Molecules. September 2011 15, 16 (9): 7980–93. PMID 21921870.
3.羅濤, 王彤敏, 李力燕. EdU與BrdU在檢測細胞增殖中的特點及應(yīng)用進展[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2015(32).