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人胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以:(1)研究腫瘤轉(zhuǎn)移機制,;(2)研究腫瘤防治;(3)為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動物模型,。
腫瘤組織塊原位移植法
實驗方法原理
用人胃癌組織塊SGC-7901 原位移植于SCID小鼠,,第4周末移植瘤向淋巴結(jié)和肝臟等器官轉(zhuǎn)移, 轉(zhuǎn)移率達66. 7% (2/3) ,,第6 周末轉(zhuǎn)移率高達* (10/ 10) ,。
實驗材料
雄性SPF級SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901
試劑、試劑盒
水合氯醛福爾馬林液
儀器,、耗材
飼養(yǎng)籠光學顯微鏡石蠟
實驗步驟
一,、實驗材料準備
1. 雄性SPF 級SCID 小鼠,6~7 周齡,, 體重20~25g ,。
2. 裸小鼠皮下傳代的人胃癌組織( SGC-7901,低分化腺癌) ,。
二,、胃癌高轉(zhuǎn)移模型建立
1. SCID 小鼠25 只, 隨機分為試驗組( n= 15) 和正常對照組( n= 10) ,。
2. 試驗組動物原位移植人胃癌組織SGC-7901:用4. 3%水合氯醛將動物麻醉后,,依次切開左上腹皮膚、腹壁和腹膜,, 仔細暴露胃壁,,在胃大彎中部用剪刀損傷胃漿膜層( 直徑約3 mm),用絲線將人胃癌組織塊( 約5 mm×7 mm,,重量為150 mg ) 縫在損傷處,,然后將胃送入腹腔內(nèi), 用0 號縫線依次縫合腹壁和皮膚,。
3. 術(shù)后觀察動物麻醉情況,,直至全部動物清醒后,送至飼養(yǎng)室。
4. 正常對照組不作處理,。
5. 手術(shù)后第2,、4、6 周末分別隨機處死試驗組動物2,、3,、2 只, 發(fā)現(xiàn)第6 周末2 只動物的癌腫均已轉(zhuǎn)移,,故余下8 只SCID 小鼠也于第6 周末處死。
6. 取胃局部生長的腫瘤組織,、腫大淋巴結(jié),、腦, 及胸腔,、腹腔內(nèi)臟器,, 以10% 福爾馬林液固定,石蠟包埋,,常規(guī)制片,,HE 染色,光學顯微鏡下觀察并記錄腫瘤生長和轉(zhuǎn)移情況,。
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