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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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人胃癌高轉(zhuǎn)移模型

時(shí)間:2022/5/14閱讀:1095
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胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以:(1)研究腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制;(2)研究腫瘤防治,;(3)為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動(dòng)物模型。


腫瘤組織塊原位移植法


實(shí)驗(yàn)方法原理    

     

用人胃癌組織塊SGC-7901 原位移植于SCID小鼠,第4周末移植瘤向淋巴結(jié)和肝臟等器官轉(zhuǎn)移,, 轉(zhuǎn)移率達(dá)66. 7% (2/3) ,第周末轉(zhuǎn)移率高達(dá)* (10/ 10) ,。


實(shí)驗(yàn)材料         


雄性SPF級(jí)SCID小鼠人胃癌組織SGC-7901


試劑,、試劑盒         


水合氯醛福爾馬林液


儀器、耗材     


飼養(yǎng)籠光學(xué)顯微鏡石蠟


實(shí)驗(yàn)步驟       

 

一,、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備

 

1.  雄性SPF 級(jí)SCID 小鼠,,6周齡,, 體重2025g 

 

2.  裸小鼠皮下傳代的人胃癌組織( SGC-7901,,低分化腺癌,。

 

二、胃癌高轉(zhuǎn)移模型建立

 

1.  SCID 小鼠25 只,, 隨機(jī)分為試驗(yàn)組( n= 15) 和正常對(duì)照組( n= 10) ,。

 

2.  試驗(yàn)組動(dòng)物原位移植人胃癌組織SGC-7901:用4. 3%水合氯醛將動(dòng)物麻醉后,依次切開(kāi)左上腹皮膚,、腹壁和腹膜,, 仔細(xì)暴露胃壁,在胃大彎中部用剪刀損傷胃漿膜層直徑約3 mm),,用絲線將人胃癌組織塊5 mm×7 mm,,重量為150 mg ) 縫在損傷處,然后將胃送入腹腔內(nèi),, 用號(hào)縫線依次縫合腹壁和皮膚,。

 

3.  術(shù)后觀察動(dòng)物麻醉情況,直至全部動(dòng)物清醒后,,送至飼養(yǎng)室,。

 

4.  正常對(duì)照組不作處理。


5.  手術(shù)后第2,、4,、周末分別隨機(jī)處死試驗(yàn)組動(dòng)物23,、只,, 發(fā)現(xiàn)第周末只動(dòng)物的癌腫均已轉(zhuǎn)移,故余下SCID 小鼠也于第周末處死,。

 

6.  取胃局部生長(zhǎng)的腫瘤組織,、腫大淋巴結(jié)、腦,, 及胸腔,、腹腔內(nèi)臟器, 以10% 福爾馬林液固定,,石蠟包埋,,常規(guī)制片,HE 染色,,光學(xué)顯微鏡下觀察并記錄腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移情況,。

 

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