日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

上海達(dá)為科生物科技有限公司
中級會員 | 第6年

18017847121

人胰腺癌裸小鼠模型

時間:2022/5/14閱讀:1255
分享:

人胰腺癌裸小鼠模型

 

實驗方法原理

 

          將人胰腺癌細(xì)胞株8988 接種于裸鼠腋窩處皮下,每周測量腫瘤大小,,第42d 處死小鼠。腫瘤組織及相關(guān)臟器送病理及電鏡檢查,,放射免疫法檢測相關(guān)抗原,。皮下腫瘤組織細(xì)胞及細(xì)胞株培養(yǎng),HE 染色,。

 

實驗材料         

 

裸小鼠BALB c nu-nu胰腺癌細(xì)胞株8988

 

試劑,、試劑盒


RPMI-1640 *培養(yǎng)基胰酶戊二醛

 

儀器、耗材    

 

CO2 培養(yǎng)箱試管

 

實驗步驟         

 

一,、實驗材料準(zhǔn)備

 

裸小鼠BALB/ c nu- nu ,,4周齡,體重1620 g,,雌雄兼?zhèn)洌?/span>SPF 級環(huán)境中飼養(yǎng),,恒溫2527 ℃,,恒濕45%50% ,飲用水及食物均經(jīng)滅菌,。

 

二,、人胰腺癌細(xì)胞株8988 體外傳代培養(yǎng)

 

1.  將人胰腺癌細(xì)胞株放入含10 %RPMI-1640 *培養(yǎng)基中,置于37 ℃,、5 %CO2 培養(yǎng)箱中,,每2d 換液1次,23d,,0. 25 %的胰酶消化,,一傳傳代培養(yǎng)。

 

2.  待細(xì)胞布滿瓶底時,收集單細(xì)胞懸液,,每只×106 腫瘤細(xì)胞,,0. 2ml ,注射于裸小鼠腋窩處皮下,,建立腫瘤模型。

 

3.  每周用游標(biāo)卡尺測量腫瘤大小,,按公式V= π/ 6 ×長×寬×高,,計算腫瘤大小,并繪制生長曲線,。

 

三,、血清學(xué)檢測

 

周時拔眼球法處死小鼠,收集血液于試管中,,靜置取血清,,檢測腫瘤相關(guān)抗原及淀粉酶。

 

四,、巨檢

 

1.  處死裸鼠后,,皮下剝離腫瘤,記錄質(zhì)地,、浸潤,、血供情況,觀察有無腹腔粘連,,各臟器轉(zhuǎn)移狀況,。

 

2.  將腫瘤組織、肺,、肝,、脾、腸系膜,、十二指腸,、胃,、腦等取標(biāo)本置于10 %的福爾馬林固定液中待用。

 

五,、病理學(xué)檢測

 

上述標(biāo)本常規(guī)石蠟包埋切片,,HE 染色,光鏡觀察,。

 

六,、超微結(jié)構(gòu)觀察

 

腫瘤組織2. 5 %戊二醛,1 %鋨酸雙固定,,包埋,,超薄切片,鈾鉛雙重染色,,透射電鏡觀察,。

 

七、鏡檢

 

1.   腫瘤組織細(xì)胞培養(yǎng)及活細(xì)胞觀察:取新鮮裸鼠皮下腫瘤組織,,PBS 漂洗次,,剪成1 m3 大小,0. 25 %的胰酶消化,,去除粗大組織后,,制成單細(xì)胞懸液,置37 ℃,、5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),,倒置顯微鏡下觀察其形態(tài)、生長情況等,, 并與細(xì)胞株8988 進行比較,。

 

2.  細(xì)胞HE 染色及形態(tài)學(xué)觀察:腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞株相同量培養(yǎng)于含有蓋玻片的六孔板中, 生長至次融合后,,棄培養(yǎng)基,,PBS 次,2. 5 %戊二醛固定,,PBS 次,,HE 染色,光鏡下觀察比較,。


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏,!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言