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吉姆薩染色實(shí)驗(yàn)

時間:2022/4/23閱讀:1335
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吉姆薩染液由天青,,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同,。但本法對細(xì)胞核和寄生蟲著色較好,,結(jié)構(gòu)顯示更清晰,而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差,。


基本方案


實(shí)驗(yàn)材料 


原位雜交玻片


試劑,、試劑盒


吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯


儀器、耗材


染色盤培養(yǎng)箱濾紙


實(shí)驗(yàn)步驟


1.  將顯影的玻片置于玻片架上,,浸入盛有水的染色盤中,。

 

11個盤:pH6.8 10 mmol/l 磷酸鈉緩沖液,所配的25倍稀釋的吉姆薩染液,。

 

23個盤:水,。

 

3)脫水系列溶液:

 

3個盤:分別盛50%70%95%乙醇,。

 

2個盤:盛有100%乙醇,。

 

3個盤:盛有二甲苯。

 

3.  25倍稀釋的吉姆薩染液中染玻片20 s(依染色時間決定染色的強(qiáng)弱),,將玻片在水中浸泡3次,,每次2 min

 

4.  連續(xù)用乙醇脫水系列溶液處理,,每盤中浸泡2 min,,將玻片移至二甲苯盤中,毎次浸泡2 min,,共3次,。


5.  在通風(fēng)櫥中,按如下操作壓片固定:用一平頭鑷(拿在左手),從二甲苯中取出一塊玻片,,夾住磨面端置水平,。加4Permount 的于另一端(切片所處位置),左手拿一干凈的蓋玻片,,很緩慢地放在載玻片上(在加壓片固定介質(zhì)和蓋玻片前,,勿使玻片變干,因微小氣泡會造成人為假象),。

 

6.  3MM 濾紙,,沿蓋玻片邊緣,小心吸去多余固片介質(zhì)/二甲苯,,并擦拭載玻片背面(勿擦拭蓋玻片),。

 

7.  將玻片平放于一硬紙盒盤上,置42℃溫孵箱2天使之凝固,。

 

8.  以剃須刀片小心刮去載玻片背面殘留膠乳,,染料及固片介質(zhì)。用鏡頭紙或普通棉紙擦去塵埃,。放入玻片盒,,必要時,載玻片上再注明標(biāo)簽,。

 

9.  顯微鏡觀察玻片,,觀察時可依信號強(qiáng)弱,調(diào)節(jié)光亮,。


注意事項(xiàng)


1.  勿將玻片直立存放于玻片中,,因此時固片介質(zhì)尚未凝結(jié)。

來源:丁香通


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