您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng),! 登錄| 免費(fèi)注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海達(dá)為科生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>吉姆薩染色實(shí)驗(yàn)
吉姆薩染液由天青,,伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同,。但本法對細(xì)胞核和寄生蟲著色較好,,結(jié)構(gòu)顯示更清晰,而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差,。
基本方案
實(shí)驗(yàn)材料
原位雜交玻片
試劑,、試劑盒
吉姆薩染色液磷酸鈉緩沖液乙醇二甲苯
儀器、耗材
染色盤培養(yǎng)箱濾紙
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 將顯影的玻片置于玻片架上,,浸入盛有水的染色盤中,。
(1)1個盤:pH6.8 10 mmol/l 磷酸鈉緩沖液,所配的25倍稀釋的吉姆薩染液,。
(2)3個盤:水,。
(3)脫水系列溶液:
①3個盤:分別盛50%、70%和95%乙醇,。
②2個盤:盛有100%乙醇,。
③3個盤:盛有二甲苯。
3. 在25倍稀釋的吉姆薩染液中染玻片20 s(依染色時間決定染色的強(qiáng)弱),,將玻片在水中浸泡3次,,每次2 min。
4. 連續(xù)用乙醇脫水系列溶液處理,,每盤中浸泡2 min,,將玻片移至二甲苯盤中,毎次浸泡2 min,,共3次,。
5. 在通風(fēng)櫥中,按如下操作壓片固定:用一平頭鑷(拿在左手),從二甲苯中取出一塊玻片,,夾住磨面端置水平,。加4滴Permount 的于另一端(切片所處位置),左手拿一干凈的蓋玻片,,很緩慢地放在載玻片上(在加壓片固定介質(zhì)和蓋玻片前,,勿使玻片變干,因微小氣泡會造成人為假象),。
6. 用3MM 濾紙,,沿蓋玻片邊緣,小心吸去多余固片介質(zhì)/二甲苯,,并擦拭載玻片背面(勿擦拭蓋玻片),。
7. 將玻片平放于一硬紙盒盤上,置42℃溫孵箱2天使之凝固,。
8. 以剃須刀片小心刮去載玻片背面殘留膠乳,,染料及固片介質(zhì)。用鏡頭紙或普通棉紙擦去塵埃,。放入玻片盒,,必要時,載玻片上再注明標(biāo)簽,。
9. 顯微鏡觀察玻片,,觀察時可依信號強(qiáng)弱,調(diào)節(jié)光亮,。
注意事項(xiàng)
1. 勿將玻片直立存放于玻片中,,因此時固片介質(zhì)尚未凝結(jié)。
來源:丁香通
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,,信息內(nèi)容的真實(shí)性,、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任,。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。