蛋白提取

組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織）

1,、頸椎脫臼處死小鼠,，75%乙醇擦拭皮膚，剪開(kāi)腹腔,，剪切肝臟組織,。

2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL,。

3,、稱(chēng)取0.6g左右肝組織,，在平皿中剪碎組織，并轉(zhuǎn)移到勻漿器,。

4,、預(yù)冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）。

5,、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液,，迅速加入勻漿器，冰浴條件下充分研磨,。

6,、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管。

7,、4℃,，15000rpm，離心10min,。

8,、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管。

9,、進(jìn)行蛋白定量,，-80℃保存。

蛋白提取

組織樣本總蛋白提?。ㄐ∈蟾谓M織）

1,、頸椎脫臼處死小鼠，75%乙醇擦拭皮膚,，剪開(kāi)腹腔,，剪切肝臟組織。

2,、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL,。

3、稱(chēng)取0.6g左右肝組織,，在平皿中剪碎組織,，并轉(zhuǎn)移到勻漿器。

4,、預(yù)冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）,。

5、取2ml預(yù)冷裂解緩沖液,，迅速加入勻漿器,，冰浴條件下充分研磨。

6,、組織研磨液轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管,。

7,、4℃，15000rpm,，離心10min,。

8、取上清組織蛋白粗提取液至新的1.5ml離心管,。

9,、進(jìn)行蛋白定量，-80℃保存,。