1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或細(xì)胞涂片PBS洗滌一次,。

2. 如果細(xì)胞貼得不牢,，可以干燥樣品使細(xì)胞貼得更牢。

3. 用4%多聚甲醛固定細(xì)胞15分鐘,，用PBS洗滌一次,。

4. 將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶封閉液，室溫孵育10分鐘,，PBS充分淋洗,；

5. 滴加正常山羊血清封閉液，室溫30分鐘,，甩去多余液體,；

6. 滴加一抗工作液，37℃孵育2h（或4℃過(guò)夜）,，然后PBS充分淋洗,；

7. 滴加兔/鼠二抗工作液，室溫孵育1h,，PBS充分淋洗,；

8. DAB顯色5-10分鐘,，在顯微鏡下掌握染色程度 ；

9. PBS或自來(lái)水沖洗1分鐘 ,；

10. 蘇木精復(fù)染3分鐘,，鹽酸酒精分化,反藍(lán)；

11. 自來(lái)水沖洗1分鐘 脫水,、透明,、封片、鏡檢,。