材料：

      6孔板

      marker筆

      直尺

      20微升槍頭（滅菌）

      無血清培養(yǎng)基

      PBS

準備：

      所有能滅菌的器械都要滅菌,，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）

流程：

      1、先用marker筆在6孔板背后,，用直尺比著,，均勻地劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道,，橫穿過孔,。每孔至少穿過5條線。

      2,、在空中加入約5X105個細胞,，具體數(shù)量因細胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿,。

      3,、第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕,，槍頭要垂直,，不要傾斜。

      4,、用PBS洗細胞3次,，去除劃下的細胞，加入無血清培養(yǎng)基,。

      5,、放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0,、6,、12、24小時取樣,，拍照,。