石蠟切片(paraffinsection)組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的方法,。不僅用于觀察正常細胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),，也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細胞組織的形態(tài)變化的主要方法,，而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中,。教學(xué)中，光鏡下觀察切片標本多數(shù)是石蠟切片法制備的,?；畹募毎蚪M織多為無色透明，各種組織間和細胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差,，在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機體后很快就會死亡和產(chǎn)生組壞死,，失去原有正常結(jié)構(gòu)，因此,，組織要經(jīng)固定,、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細胞組織死亡,，而能清晰辨認其形態(tài)結(jié)構(gòu),。
　　基本技術(shù)
　　說明
　　包括取材、固定,、洗滌和脫水,、透明、浸蠟,、包埋,、切片與貼片、脫蠟,、染色,、脫水,、透明、封片等步驟,。一般的組織從取材固定到封片制成玻片標本需要數(shù)日,，但標本可以長期保存使用，為顯微玻片標本,。
　　取材
　　應(yīng)根據(jù)要求選取材料來源及部位,。例如植物細胞有絲分裂多選取洋蔥根尖，細胞分裂快又便于切取;豬的肝小葉邊界清晰明確;耳蝸以豚鼠的內(nèi)耳易于定位和剝離,。材料必須新鮮,，擱置時間過久則產(chǎn)生蛋白質(zhì)分解變性，導(dǎo)致細胞自溶及細菌的滋生,，而不能反映組織活體時的形態(tài)結(jié)構(gòu),。
　　固定
　　用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)藥液--固定液浸漬切成小塊的新鮮材料，迅速凝固或沉淀細胞和組織中的物質(zhì)成分,、終止細胞的一切代謝過程,、防止細胞自溶或組織變化，盡可能保持其活體時的結(jié)構(gòu),。固定能使組織硬化,，有利于切片的進行，而且也有媒浸作用,，有利于組織著色,。固定液的種類很多，其對組織的硬化收縮程度以及組織內(nèi)蛋白質(zhì),、脂肪,、糖類等物質(zhì)的作用各不相同。例如純酒精可固定肝糖而能溶解脂肪,，甲醛能固定一般組織，但溶解肝糖和色素,。固定液可分為單一固定液及混合固定液,。前者有甲醛(乙醛、福爾馬林),、酒精,、醋酸或冰醋酸、重鉻酸鉀等,，單一固定液不能固定細胞中的所有成分;混合固定液可以互補不足,，常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液,、FAA液,、Carnoy氏液,、SuSa液(配方見有關(guān)技術(shù)書籍)。因此,，應(yīng)根據(jù)所要顯示的內(nèi)容來選擇適宜的固定液,。10%福爾馬林(4%甲醛)或10%磷酸緩沖福爾馬林是病理切片常規(guī)使用的固定液，不僅適用于常規(guī)H精-伊紅)染色,，還可以用于組織學(xué)有關(guān)的其他技術(shù)的切片染色,。固定液的用量通常為材料塊的20倍左右，固定時間則根據(jù)材料塊的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定,，可以從1小時至數(shù)天,，通常為1小時至24小時。
　　洗滌與脫水
　　固定后的組織材料需除去留在組織內(nèi)的固定液及其結(jié)晶沉淀,，否則會影響后期的染色效果,。該步驟稱作洗滌多數(shù)用流水沖洗;使用酒精或酒精混合液固定的組織，則不必洗滌,，可直接進行脫水,。固定后或洗滌后的組織內(nèi)充滿水分，若不除去水分則無法進行以后的透明,、浸蠟與包埋處理,，原因在于透明劑多數(shù)是苯類，苯類和石蠟均不能與水相融合,，水分不能脫盡,，苯類無法浸入。酒精為常用脫水劑,，它既能與水相混合,，又能與透明劑相混。為了減少組織材料的急劇收縮,，應(yīng)使用從低濃度到高濃度遞增的順序進行,，通常從30%或50%酒精開始，經(jīng)70%,、85%,、95%直至純酒精(無水乙醇)，每次時間為1~數(shù)小時,，如不能及時進行各級脫水,，材料可以放在70%酒精中保存，因高濃度酒精易使組織收縮硬化,，不宜處理過久,。正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陸環(huán)等也可做脫水劑,。