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SNP檢測(cè)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

時(shí)間:2015/7/1閱讀:237
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關(guān)鍵詞:SNP檢測(cè)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
簡(jiǎn)介:世界*品牌SNP檢測(cè)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)原裝,,質(zhì)量保證,*,。
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測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
該系統(tǒng)采用ABI 3730xl DNA測(cè)序儀,分型準(zhǔn)確率≧99.9%,,分型成功率≧95%,。和PCR重測(cè)序一樣,SNaPshot分型也是SNP檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),。適合5-12個(gè)及以上的SNP位點(diǎn)的檢測(cè),。該檢測(cè)方法的主要原理為單堿基延伸技術(shù)。即在緊鄰SNP位點(diǎn)的地方設(shè)計(jì)引物,,反應(yīng)時(shí)加入SNP位點(diǎn)引物,,擴(kuò)增出的帶有SNP位點(diǎn)的PCR產(chǎn)物,帶熒光標(biāo)記的ddNTP,,通過單堿基延伸后引物帶上SNP位點(diǎn)堿基相關(guān)的熒光,,隨后將反應(yīng)產(chǎn)物在ABI 3730xl核酸檢測(cè)儀上分析后,就能得到SNP位點(diǎn)的信息,。該方法一個(gè)反應(yīng)就能檢測(cè)5-12個(gè)SNP位點(diǎn),,在充分利用測(cè)序法準(zhǔn)確直觀的優(yōu)點(diǎn)的同時(shí),增加了一次反應(yīng)檢測(cè)的位點(diǎn)數(shù),,極大地降低了實(shí)驗(yàn)成本,。
*檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確率在99.9%以上,和測(cè)序法一樣是SNP檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn),。
*一次檢測(cè)5-12個(gè)位點(diǎn),,96個(gè)樣品,適合中到大型SNP分型項(xiàng)目,。
*應(yīng)用靈活,。可以根據(jù)需要靈活定制實(shí)驗(yàn)方案,,檢測(cè)基因組中任意位置的SNP位點(diǎn),,甚至可以將不同物種的*基因組放在一起進(jìn)行檢測(cè),。
*檢測(cè)費(fèi)用相對(duì)較低。
CR-測(cè)序法:
zui經(jīng)典的方法,,通過PCR擴(kuò)增包含SNP位點(diǎn)的片段,,測(cè)序獲得SNP位點(diǎn)信息,適于調(diào)查未知SNP位點(diǎn)和連續(xù)分布(1kb以內(nèi))的SNP位點(diǎn)信息,。
PCR-限制性酶切,;
如果某個(gè)SNP位點(diǎn)恰好是限制性酶切位點(diǎn),則通過PCR酶切再結(jié)合電泳分析不失為一種簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的區(qū)分方法,,適于單個(gè)的SNP位點(diǎn)分析,。
連接酶檢測(cè)反應(yīng)(LDR)分型方法:
連接酶只能連接與模板*互補(bǔ)的兩個(gè)片段,利用連接酶這一特性,,通過對(duì)需檢測(cè)SNP位點(diǎn)上下游設(shè)計(jì)特異性標(biāo)記探針,在連接酶的作用下,當(dāng)特異性的寡核苷酸探針與互補(bǔ)靶序列DNA*配對(duì)時(shí)連接反應(yīng)得以順利進(jìn)行,若寡核苷酸探針與其不*配對(duì),則連接反應(yīng)不能進(jìn)行,。zui后通過測(cè)序儀檢測(cè)標(biāo)記的寡核苷酸探針,得到分型結(jié)果,,是一種簡(jiǎn)單的分型方法,,適于樣本量和位點(diǎn)數(shù)目都不大的SNP分析。
HRM:
用熒光定量PCR中的染料法做出的高分辨率溶解曲線,,區(qū)分只有單一堿基不同的PCR擴(kuò)增片段,,只能在溫控均一度在±0.1℃的儀器中使用。成本低,,適合少數(shù)位點(diǎn)多樣品的SNP掃描,。
Taqman 探針法
應(yīng)用ABI7900、ABI 7500型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀,,采用ABI合成探針或國(guó)產(chǎn)探針,,完成SNP的檢測(cè)分析,適用于位點(diǎn)少,,樣本通量高的檢測(cè),。
焦磷酸測(cè)序( Pyrosequencing )
應(yīng)用Qiagen公司PyroMark Q96 ID平臺(tái),可定量等位基因,,即使是低頻率等位基因,;同時(shí)可檢測(cè)未知突變;不同的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)可同時(shí)在一次運(yùn)行中實(shí)現(xiàn),;
質(zhì)譜法
Sequnom質(zhì)譜法將穩(wěn)健的單堿基引物延伸反應(yīng)與靈敏可靠的MALDI-TOF質(zhì)譜檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合,,提供了高靈敏性低成本的SNP檢測(cè)服務(wù)。該檢測(cè)服務(wù)采用專業(yè)的引物設(shè)計(jì)和基因分型軟件,,可對(duì)95%以上已被證實(shí)的SNP進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),。一張芯片可平行完成384個(gè)樣本的實(shí)驗(yàn),單個(gè)wellzui高可達(dá)40重反應(yīng)。

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