土壤無機磷（soil inorganic phosphorus,，S-PHOS）含量試劑盒說明書

分光光度法 50 管/48 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

磷是植物必需大量元素。植物主要通過根系從土壤中獲取磷元素,。土壤磷包括有機磷和無機磷,。土壤有機磷經(jīng)過礦化分解而轉化為無機磷，才能進一步被植物吸收利用,。

測定原理：

從土壤中提取無機磷，在酸性環(huán)境中,，通過鉬藍法定磷,，即可計算出無機磷含量。

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試劑組成和配制：

試劑一：液體×1 瓶,，4℃保存,。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用,；

試劑三：粉劑×1 瓶,， 4℃避光保存,。臨用前配制,，加入 20 ml 蒸餾水,，充分溶解后加入 10 ml 試劑二，混勻,；

標準品：液體×1 支,，20 μmol/L 無機磷標準液,，4℃保存,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

自備儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機,、可調(diào)式水浴鍋，分析天平,、可調(diào)式移液器,、1ml 玻璃比色皿,、蒸餾水和 100 目篩子,。

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取 10 ml 離心管,，加入精確稱取的 100 目篩子過篩的風干土樣約 0.1g,，加入 10 ml 提取液,，震蕩混勻,，然后置于 40℃水浴浸提 1 h,，8000g,，25℃,，離心 10min,，取上清液,，待測。

測定步驟：

1. 分光光度計預熱 30 min,，調(diào)節(jié)波長到 660 nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2. 打開水浴鍋,，調(diào)節(jié)溫度到 40℃。

3. 空白管：取EP 管,，依次加入 500μl 蒸餾水,，500μl 試劑三,，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 空白管。

4. 標準管：取EP 管,，依次加入 50μl 標準液，450μl 蒸餾水,，500μl 試劑三,，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 標準管,。

5. 測定管：取EP 管,，依次加入 50μl 上清液，450μl 蒸餾水,，500μl 試劑三,，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 測定管,。

需在 40min 內(nèi)完成比色。

土壤無機磷含量計算公式：

S-PHOS（nmol/d /g 干重）= [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總÷W

= 200×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W

C 標準液：20 μ mol/L,；V 總：總上清液體積,，10 ml=0.01 L,；W：土壤樣品質(zhì)量，g,。

注意事項：

1,、空白管和標準管只需測定一次。

2、試劑三需臨用前配制,，限當天使用,。試劑三配制過程中,，可能會產(chǎn)生黑色固體，其不影響結果,，注意吸取時不要將黑色固體吸入。

3,、40min 內(nèi)完成比色。

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