土壤外切-β-1，4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶（S-C1）活性測定試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

C1（EC3.2.1.91）存在于細菌,、真菌和動物體內(nèi),，是纖維素酶系的組份之一，C1 催化多聚糖鏈的末端非還原端釋放出纖維二糖和葡萄糖。

測定原理：

采用 3,5－二硝基水楊酸法測定C1 催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量,。

纖維二糖苷酶（S-C1）活性測定試劑盒 土壤

試劑的組成和配制：

自備儀器和用品：

可見分光光度計,、水浴鍋、離心機,、可調(diào)式移液器,、1ml 玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

樣品測定的準備：

稱取約 0.1g 新鮮土樣或風干土樣，加入 1ml 提取液,，進行冰浴勻漿,，室溫振蕩提取 30min，然后 10000g 4℃離心 10min,，取上清,，置冰上待測。

測定步驟：

1,、分光光度計預熱 30min 以上,，調(diào)節(jié)波長至 540nm，蒸餾水調(diào)零,。

2,、加樣表（在EP 管中依次加入下列試劑）：

混勻，37℃準確水浴 2h

混勻,， 90℃水浴 10min（蓋緊,，防止水分散失），冷卻后,，測 540nm 下吸光值A,，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管需設一個對照管,。

S-C1 活性計算：

標準條件下測定回歸方程為 y = 6.4078x - 0.0673,；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值,。單位的定義：每g 土樣每分鐘催化產(chǎn)生 1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位,。

S-C1 活力(μg /min /g 鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反總]÷(W× V 樣÷V 樣總)

÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

1000：1mg/ml=1000ug/ml；V 反總：反應體系總體積,，0.55ml,； V 樣：加入樣本體積，0.05 ml,；V 樣總：加入提取液體積,，1 ml,；T：反應時間，120 min,；W：樣本質(zhì)量,，g。

纖維二糖苷酶（S-C1）活性測定試劑盒 土壤