銅藍蛋白(Ceruloplasmin,，Cp)測定試劑盒說明書

微量法 100T/48S

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

銅藍蛋白是血漿的含銅蛋白，有運輸銅的功能,，同時具有氧化酶的活性,，是細胞外液重要的抗氧化劑。

測定原理：

銅藍蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基聯苯胺生成藍色產物,，在 645nm 處有特征吸收峰,，依此可得銅藍蛋白活性。

銅藍蛋白測定試劑盒 抗氧系列-常備現貨

組成：

試劑三：液體 15ml×1 瓶,，4℃避光保存,。（使用前 37℃預熱）

自備儀器和用品：

天平、可見分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水,。

測定操作表

1、分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上,，調節(jié)波長至 645nm,，蒸餾水調零。

2,、操作表

計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1,、按體積計算

酶活定義:37℃條件下,， 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高 0.01 為一個酶活單位,。

Cp 活力（U/ml）=ΔA×V 反總÷0.01÷V 樣÷T = 33.33×ΔA 2,、按鮮重計算

單位定義：37℃條件下,，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高 0.01 為一個酶活單位,。

Cp 活力（U/g 鮮重）=ΔA×V 反總÷0.01÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T = 33.33×ΔA÷W 3,、按蛋白濃度計算

單位定義：37℃條件下,，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高 0.01 為一個酶活單位。

Cp 活力（U/ mg prot）=ΔA×V 反總÷0.01÷（Cpr×V 樣）÷T = 33.33×ΔA÷Cpr

V 樣：0.03 ml,；V 反總：0.3 ml,；T：反應時間，30min,；V 樣總：加入提取液體積,，1ml； Cpr：樣本蛋白質濃度,，mg/ml,；W：樣本質量，g

b. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1,、按體積計算

酶活定義:37℃條件下,， 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高 0.005 為一個酶活單位。

Cp 活力（U/ml）=ΔA×V 反總÷0.005÷V 樣÷T = 66.66×ΔA

2,、按鮮重計算

單位定義：37℃條件下,，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高 0.005 為一個酶活單位。

Cp 活力（U/g 鮮重）=ΔA×V 反總÷0.005÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T = 66.66×ΔA÷W 3,、按蛋白濃度計算

單位定義：37℃條件下,，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高 0.005 為一個酶活單位。

Cp 活力（U/ mg prot）=ΔA×V 反總÷0.005÷（Cpr×V 樣）÷T = 66.66×ΔA÷Cpr

V 樣：0.03 ml,；V 反總：0.3 ml,；T：反應時間，30min,；V 樣總：加入提取液體積,，1ml； Cpr：樣本蛋白質濃度,，mg/ml,；W：樣本質量，g

注意事項:

試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性,，請操作時做好防護措施,。

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