諾博萊德 Hoechst33258染色液(1mg/ml)

Hoechst33258染色液(1mg/ml) 細(xì)胞周期

Hoechst 33258 也稱 bisBenzimide H 33258或HOE 33258,，分子式為 C25H24N6O 3HCl，分子量為533.88,，CAS Number 23491-45-4,。Hoechst 33258 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對細(xì)胞的毒性較低,，常用于細(xì)胞凋亡檢測,，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33258也用于普通的細(xì)胞核染色,、DNA染色,。

Hoechst 33258的最大激發(fā)波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm,，Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,，最大激發(fā)波長為352nm，最大發(fā)射波長為461nm,。NobleRyder Hoechst 33258染色液是濃縮的儲(chǔ)存液,，稀釋后使用，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml,，用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,。

產(chǎn)品組成：

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

自備材料：

1、熒光顯微鏡

2,、蒸餾水

3,、微量秱液器

4、PBS 或生理鹽水

操作步驟(僅供參考)：

(一)固定的組織細(xì)胞染色

1,、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求,，用無菌去離子水秲釋到自己所需濃度,，即為Hoechst 33258染色工作液。細(xì)胞核染色時(shí),，一般推薦工作濃度為1～5μ g/ml,。

2、于細(xì)胞或組織樣品,，固定后沖洗去除固定劑,。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色,，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色,，如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色,。對于貼壁細(xì)胞或組織切片,，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可,。對于懸浮細(xì)胞,，少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst 33258染色液，充分混勻,。

3,、室溫放置 5～8min。

4,、輕輕吸除Hoechst 33258染色液,。

5、用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗2～3次,，每次3～5min,。

6、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察,。

(二)活細(xì)胞染色

1,、據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求，用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度,，即為Hoechst 33258染色工作液,。細(xì)胞核染色時(shí)，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml,。

2,、取96、24,、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài),，按96孔板加入100μl,、24孔板加入500μl,、6孔板加入1ml的比例,，加入適當(dāng)?shù)腍oechst 33258染色液，染液必須充分覆蓋細(xì)胞,。

3,、在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)20～30min。

4,、輕輕吸除Hoechst 33258染色液,。

5、用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗 2～3 次,，每次 3～5min,。

6、進(jìn)行熒光檢測,。

注意事項(xiàng)：

1,、NobleRyder Hoechst 33258染色液(1mg/ml)應(yīng)稀釋至合適的濃度后使用。

2,、熒光染料都存在淬滅的問題,，建議染色后盡快檢測?；罴?xì)胞或組織染色后宜立即觀察,。

3、為減緩熒光淬滅,，可以使用抗熒光淬滅封片液,。

4、避免反復(fù)凍融,，否則容易失效,。

5、Hoechst33342對人體有一定刺激性,，請注意適當(dāng)防護(hù),。

6、為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

有效期：12個(gè)月有效。

Hoechst33258染色液(1mg/ml) 細(xì)胞周期

產(chǎn)品訂購信息

D0811   Hoechst33258染色液(1mg/ml)  1ml