諾博萊德  Hoechst33342染色液

Hoechst33342染色液   細(xì)胞周期及凋亡染色

Hoechst33342也稱bisBenzimideH33342或HOE33342,。分子式為C27H28N6O 3HCl 3H2O，分子量為615.99,，CAS Number 23491-52-3,。Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低,，常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst33342 也用于普通的細(xì)胞核染色,、DNA 染色,。

Hoechst33342的最大激収波長(zhǎng)為346nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為460nm,，Hoechst33342和雙鏈DNA結(jié)合后,，最大激収波長(zhǎng)為352nm，最大収射波長(zhǎng)為461nm,。NobleRyder Hoechst33342染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

產(chǎn)品組成：

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

自備材料：

1,、熒光顯微鏡

2,、蒸餾水

3、微量秱液器

4,、PBS 或生理鹽水

操作步驟(僅供參考)：

(一)固定的組織細(xì)胞染色

1,、對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑,。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst33342染色,，如果丌需要進(jìn)行其它染色,，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst33342染色。對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst33342染色液,，覆蓋住樣品即可,。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst33342染色液,，充分混勻。

2,、室溫放置 5～8min,。

3、輕輕吸除Hoechst33342染色液,。

4,、用無(wú)菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min,。

5,、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

(二)活細(xì)胞染色

1,、取96,、24、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài),，按96孔板加入100μl,、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例,，加入適當(dāng)?shù)腍oechst33342染色液,，染液必須充分覆蓋住細(xì)胞。

2,、在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)20～30min,。

3、輕輕吸取Hoechst33342染色液,。

4,、用無(wú)菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min,。

5,、進(jìn)行熒光檢測(cè)

染色結(jié)果：細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染,，或呈碎塊狀致密濃染,。 

注意事項(xiàng)：

1、Hoechst33342染色液的濃度適用于各種常規(guī)染色的需要,。

2,、熒光染料都存在淬滅的問(wèn)題，建議染色后盡快檢測(cè)。

3,、為減緩熒光淬滅,，可以使用抗熒光淬滅封片液。

4,、避免反復(fù)凍融,，否則容易失效。

5,、Hoechst33342對(duì)人體有一定刺激性,，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。

6,、為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6個(gè)月有效,。

Hoechst33342染色液   細(xì)胞周期及凋亡染色

產(chǎn)品訂購(gòu)信息

D0813  Hoechst33342染色液  10ml