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CC96303GV3101(pSoup-19)感受態(tài)
參考價: | 面議 |
- CC96303 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):65更新時間:2025-04-24 10:09:11
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產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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貨號 | CC96303 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CC96303
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,,不可用于臨床診斷或治療,。
產(chǎn)品介紹
GV3101(pSoup-19)感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
p19 蛋白來源于番茄叢矮病毒,可抑制宿主對外源基因的 RNA 沉默效應,,提高異源基因轉(zhuǎn)錄本的
穩(wěn)定性,,進而促進異源蛋白的表達,廣泛應用于轉(zhuǎn)基因植物及煙草葉片,,擬南芥葉片,,番茄葉片
或原生質(zhì)體的瞬時表達系統(tǒng)中。GV3101 菌株為 C58 型背景,,核基因中含有篩選標簽——利福平抗
性基因 Rif,,為了便于轉(zhuǎn)化操作,此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pMP90
(pTiC58DT-DNA),,此質(zhì)粒含有 vir基因,,pMP90 (pTiC58DT-DNA)型 Ti 質(zhì)粒含有篩選標簽:Gent,
賦予 GV3101菌株慶大霉素抗性,;在 GV3101菌株中轉(zhuǎn)入 help質(zhì)粒:pSoup-p19即為 GV3101(pSoup
p19)菌株,,可幫助 pGreen,62SK,,pGs2 等質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中復制,,同時賦予該菌株四環(huán)素(Tet)抗
性。適用于擬南芥,、煙草,、玉米、土豆等植物的轉(zhuǎn)基因操作,。本公司生產(chǎn)的 GV3101(pSoup-p19)化
學轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,,pGs2(卡那霉素抗性)質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率≥ 103 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
GV3101(pSoup-p19)
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:C58 (RifR) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( GentR) Nopaline(pSoup-p19-TetR)
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
除胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pMP90 和 pSoup-p19 質(zhì)粒外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥103 cfu/μg DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,在手心融化成冰水混合物,,置于冰水浴中,;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μl 感受態(tài)細胞中,,用手撥da管底混勻,依次于冰上靜置 10 分鐘,、液氮 5 分
鐘(或干冰乙醇浴和-80℃冰凍),、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘,;
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,,于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時;
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的 YEB 平板
上,,倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天(當平板只含有 50 μg/ml Kan 時,28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可,;平板中同
時加入 50 μg/ml Kan,,20 μg/ml Rif 時,需 28 ℃培養(yǎng) 60 h,;如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要
28 ℃培養(yǎng) 72-90 h),。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10,;
3. 利福平濃度不應高于 25 μg/μl,,利福平濃度過高不利于農(nóng)桿菌生長,會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率,。
4. 由于 Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低(可以忽略),,所以相關抗性基因可以不用添加。
GV3101(pSoup-19)感受態(tài)
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