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上海語(yǔ)純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年CC96314EHA105（pSoup）感受態(tài)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- CC96314 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠(chǎng)商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù)：61更新時(shí)間：2025-04-24 10:05:10
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CC96314 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：CC96314
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
EHA105（pSoup）感受態(tài)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
EHA105 菌株由 EHA101 菌株改造而來(lái),，為 C58 型背景,，核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基
因 Rif,，為了便于轉(zhuǎn)化操作，此菌株攜帶一無(wú)自身轉(zhuǎn)運(yùn)功能的琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA105
(pTiBo542DT-DNA),，此質(zhì)粒含有 vir 基因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件,，
pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的 T-DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T
DNA 順利轉(zhuǎn)移),。在 EHA105 菌株中轉(zhuǎn)入 help 質(zhì)粒：pSoup 即為 EHA105 (pSoup)菌株,，可幫助
pGreen，62SK,，pGs2 系列質(zhì)粒在農(nóng)桿菌中復(fù)制,，同時(shí)賦予該菌株四環(huán)素（Tet）抗性，適用于水稻,、
煙草等植物的轉(zhuǎn)基因操作,。本公司生產(chǎn)的 EHA105(pSoup)化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,，
pGs2(卡那霉素抗性)質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
EHA105(pSoup)
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100 μL
定制
基因型：C58 (RifR) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) Succinamopine (pSoup-TetR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存; 請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
除琥珀堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA105 和 pSoup 質(zhì)粒外,，無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,，在手心融化成冰水混合物,，置于冰水浴中；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,，用手撥da管底混勻,，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）,、37 ℃水浴 5 分鐘,、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無(wú)抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基,，于 28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí),；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上,，倒置放于 28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天（當(dāng)平板只含有 50 μg/ml Kan 時(shí),，28 ℃培養(yǎng) 48 h 即可；平板中同
時(shí)加入 50 μg/ml Kan,，20 μg/ml Rif 時(shí),，需 28 ℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif 則需要 28℃
培養(yǎng) 72-90 h）,。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用,；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 利福平濃度不應(yīng)高于 25 μg/μl,，過(guò)高的利福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng),，會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率；
4.因?yàn)?nbsp;Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低（可以忽略）,， 一般培養(yǎng)農(nóng)桿菌時(shí)不考慮添加相應(yīng)抗生素,。
EHA105（pSoup）感受態(tài)
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