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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96193 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：CC96193
產品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用,，不可用于臨床診斷或治療,。
產品介紹
DH10B plus
DH10B-Plus 感受態(tài)細胞用電擊法轉化的效率較高,，故不推薦使用熱激法化學轉化。DH10B-Plus 菌
株來源于 DH10B 菌株,，在 DH10B 菌株中引入 Hte 突變，提高了細胞膜的通透性和對瞬時高壓的耐
受進而提高了電擊轉化效率。DH10B-Plus 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA
(無論真核生物還是原核生物的基因組 DNA 都能被高效的轉入 DH10B-Plus 中),。recA1 和 endA1 的
突變有利于插入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質粒 DNA 的提取， lacZΔM15 標記的存在使 DH10B-Plus 可
用于藍白斑篩選,。DH10B-Plus 電擊感受態(tài)細胞具有鏈霉素和四環(huán)素抗性,，適用于大質粒的構建或
各種文庫構建，經特殊工藝處理,，pUC18 質粒檢測轉化效率可達 1010 cfu/μg DNA,。
產品組成
組分
DH10B-plus 感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697
galE15 galK λ- rpsL nupG Hte (TetR)
存儲條件
-80 ℃保存,；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留,；
化學法轉化效率≥1010 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化,；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,，輕輕彈勻，轉入冰上預冷的電擊轉化杯中,；
3. 使用電轉儀進行電擊轉化（轉化參數為：2mm 電擊杯,，2.5kv，200Ω,，電轉化時間一般為 4-5 ms
左右）,；
4. 電擊后迅速取出電擊杯，向其中加入 900 μL 液體 LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱）,，然后
置于 37 ℃搖床復壯 45 min,；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰上解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 不應含有較高的離子強度,，建議總體積不超過 5 μl,，一般為 1-2 μl；
3. 為確保高轉化效率,，電轉化杯一定要在冰上預冷,；
4. 如使用 1 mm 電擊杯，則轉化參數改為 1.25 kv 和 200 Ω,。
DH10B plus
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