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產品簡介
供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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貨號 | CC96108 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號:CC96108
產品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療,。
產品介紹
DH10B T1感受態(tài)
產品簡介
大腸桿菌 DH10B T1 中的 tonA 突變賦予了該菌對噬菌體 T1 和 T5 的抗性,,可以保護寶貴的文庫免
受污染。此外,,甲基化依賴的限制系統(mcrA,、mcrBC 和 mrr)的突變使 DH10B T1 成為構建原核和
真核基因組文庫的理想選擇。該菌株還具有 ΔlacZM15 基因型,,因此可以在含有 X-Gal 的平板上進
行藍/白篩選,。該菌株的化學感受態(tài)效率不高,常使用電轉化感受態(tài),;經 pUC18 質粒轉化檢測,,
DH10B T1 化學感受態(tài)細胞的轉化效率達 107 cfu/μg DNA 以上。
產品組成
組分
DH10B T1
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ-
rpsL nupG tonA
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min,;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,熱激 90s 后,,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min,;
5. 取不同體積的轉化產物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用,;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔,。
DH10B T1感受態(tài)
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