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產品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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貨號 | CC96174 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號:CC96174
產品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用,,不可用于臨床診斷或治療。
產品介紹
HB101 感受態(tài)
產品簡介
HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的雜合產物(同時也是 Stbl3 的原始菌株),。該菌株
攜帶 recA13 突變,,可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組,,降低錯誤重組的概率,;但由于其不含核
酸酶 endA1 突變,,體內核酸酶含量較高,,提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中的去蛋白液以去除
核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失內切酶系統(tǒng),,增強了外源 DNA 的穩(wěn)定性和提取質量,;此菌株具
有鏈霉素抗性,;不存在 lacIqZΔM15,不可用于藍,、白斑篩選,。經 pUC18 質粒轉化檢測,HB101 感
受態(tài)細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA,。
產品組成
組分
HB101
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- mcrB mrr hsdS20 (rB- mB- ) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (StrR) glnV44 λ-
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留,;
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化,;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min,;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,熱激 90s 后,,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min,;
5. 取不同體積的轉化產物,,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用,;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保高轉化效率,,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔。
HB101 感受態(tài)
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