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上海語純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年EC96194ClearColi K12電轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- EC96194 產(chǎn)品型號(hào)
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：49更新時(shí)間：2025-04-21 12:29:50
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×50ul/100×50ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | EC96194 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：EC96194
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×50ul/100×50ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
ClearColi K12電轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
ClearColi K12 感受態(tài)細(xì)胞用電擊法轉(zhuǎn)化的效率較高,，故不推薦使用熱激法化學(xué)轉(zhuǎn)化,。ClearColi K12
菌株來源于 K12 endArecA-菌株,，并在其中引入突變，導(dǎo)致 ClearColi K12 細(xì)胞壁外層的脂多糖被修
飾（LPS 的低聚糖鏈被刪除,，同時(shí) LPS 的兩個(gè)?；溡脖粍h除），進(jìn)而破壞了 ClearColi K12 大腸
桿菌的內(nèi)毒素信號(hào)通路,，使得從該細(xì)胞中提取的蛋白或質(zhì)粒 DNA 中的內(nèi)毒素含量極低,，提取的無
內(nèi)毒素質(zhì)粒廣泛應(yīng)用于后續(xù)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化。ClearColi K12 同時(shí)缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)和重組
酶 (recA),，提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量,。吐露港生物開發(fā)的 ClearColi K12 電擊感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特
殊工藝制作，pUC18 質(zhì)粒檢測(cè)的電轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
ClearColi K12
電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞
10 × 50 μL
100 × 50 μL
定制
基因型：F- λ- ?endA ?recA frr181 msbA52 ?gutQ ?kdsD ?lpxL ?lpxM ?pagP ?lpxP ?eptA
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,；
電轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化,；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,，輕輕彈勻,，轉(zhuǎn)入冰上預(yù)冷的電擊轉(zhuǎn)化杯中；
3. 使用電轉(zhuǎn)儀進(jìn)行電擊轉(zhuǎn)化（轉(zhuǎn)化參數(shù)為：2 mm 電擊杯,，2.5 kv,，200 Ω，電轉(zhuǎn)化時(shí)間一般為 4-5
ms 左右）,；
4. 電擊后迅速取出電擊杯,，向其中加入 900 μL 液體 LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），然后
置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min,；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰上解凍后應(yīng)立即使用,；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 不應(yīng)含有較高的離子強(qiáng)度，建議總體積不超過 5 μl,，一般為 1-2 μl,；
3. 為確保最高轉(zhuǎn)化效率，電轉(zhuǎn)化杯一定要在冰上預(yù)冷,；
4. 如使用 1 mm 電擊杯,，則轉(zhuǎn)化參數(shù)改為 1.25 kv 和 200 Ω。
ClearColi K12電轉(zhuǎn)克隆感受態(tài)
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