支原體高效清除劑(2000X)

產(chǎn)品描述

支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的世界性問(wèn)題,，世界各國(guó)的細(xì)胞支原體污染平均比例為30~60%。支原體直徑約為 0.1~0.3μm,，具有變形能力,，可透過(guò)常見(jiàn)過(guò)濾膜（0.22~0.45μm），因此常規(guī)的無(wú)菌過(guò)濾方法不能將其去除,，常用的抗生素也對(duì)支原體無(wú)效,。支原體可通過(guò)細(xì)胞之間交叉污染，操作人員的口腔,、皮膚造成污染,、血清等添加物而帶入污染。由于支原體無(wú)法通過(guò)常規(guī)的光學(xué)顯微鏡觀察到,，不會(huì)引起培養(yǎng)基混濁,，因此細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺(jué)。支原體會(huì)消耗必須氨基酸，影響細(xì)胞生長(zhǎng)速率,，造成代謝物累積,，改變細(xì)胞形態(tài)，影響DNA,、RNA,、蛋白質(zhì)的合成，抑制細(xì)胞因子表達(dá),，改變被污染細(xì)胞的基因表達(dá)譜,，誘導(dǎo)染色體畸變。Anweisci支原體高效清除劑經(jīng)過(guò)了上百種細(xì)胞的測(cè)試和長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,，能以較低的濃度殺滅支原體,，不僅可用于細(xì)胞株/系，還可應(yīng)用于敏感和較脆弱的細(xì)胞,，如干細(xì)胞和原代細(xì)胞。本產(chǎn)品僅12小時(shí)就可以顯著抑制支原體生長(zhǎng),，1~2周左右即可清除支原體污染,，且不影響細(xì)胞本身的代謝，兼具特異性和高效清除支原體的特點(diǎn),，且對(duì)細(xì)胞溫和無(wú)損傷,，挽救您的珍貴細(xì)胞。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

ê高效性,，12h即可有效抑制支原體的增殖,；

ê高特異性，特異性清除支原體,；

ê無(wú)耐藥性,，活性成分為多肽類(lèi)，不會(huì)產(chǎn)生耐藥性,；

ê高利用率,，未被利用的成分可降解為氨基酸被細(xì)胞利用；

ê高安全性,，對(duì)細(xì)胞幾乎無(wú)毒性,，已在上百種細(xì)胞上驗(yàn)證。

質(zhì)量控制

R R 通過(guò)支原體,、真菌,、支原體、內(nèi)毒素檢測(cè),。

R R 通過(guò)滲透壓,、pH 檢測(cè)。
R通過(guò)產(chǎn)品性能檢測(cè)。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸,；

-20℃避光保存,，保質(zhì)期2年；

使用方法

從-20℃冰箱內(nèi)取出支原體高效清除劑,，將試劑管瞬時(shí)離心（3000rpm,，3~5s）后放置于EP管架上，

用75%的酒精噴灑試劑管的表面,，在生物安全柜中進(jìn)行無(wú)菌操作,；

以T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶為例

清除支原體污染操作規(guī)程

對(duì)于已檢測(cè)或懷疑有支原體污染的細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量支原體高效清除劑,，通常推薦使用的稀釋倍數(shù)為2000×,，如：6 mL的細(xì)胞培養(yǎng)基加入3 μL的支原體高效清除劑混勻。連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周即可有效清除支原體污染,。若支原體污染較嚴(yán)重,，可酌情增加藥物濃度以提高清除支原體的效率，推薦嘗試最小稀釋倍數(shù),、中間稀釋倍數(shù),、最大稀釋倍數(shù)三個(gè)濃度進(jìn)行測(cè)試。以細(xì)胞系（成纖維樣）為例,，建議將細(xì)胞分為三份,，分別采用500×、1000×,、2000×三個(gè)濃度進(jìn)行支原體清除,。若500×對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯影響，可采用500×濃度快速清除支原體,，若500×對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有明顯影響,，則采用1000×濃度清除支原體，連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周（或傳代3次）后,，檢測(cè)是否還存在支原體污染,。如果還存在支原體污染，可繼續(xù)培養(yǎng)1周,。

注意：可參考下表選擇稀釋倍數(shù),，達(dá)到最佳清除效果。

支原體高效清除劑(2000X)

預(yù)防支原體污染操作規(guī)程

若細(xì)胞需長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng),，建議每2~3周進(jìn)行定期預(yù)防,。在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量支原體高效清除劑，通常推薦使用的稀釋倍數(shù)為3000×,，如：6mL的細(xì)胞培養(yǎng)基加入2μL的支原體高效清除劑混勻,。連續(xù)加藥培養(yǎng)1~2周,，即可有效防止支原體污染或抑制支原體增殖。
注意：可參考下表選擇稀釋倍數(shù),，有效預(yù)防支原體污染,。


實(shí)驗(yàn)流程圖

特別提醒

①使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)；

②本產(chǎn)品經(jīng)0.1 μm 過(guò)濾除菌,，使用本產(chǎn)品時(shí)無(wú)需過(guò)濾,，可直接加入培養(yǎng)基使用；

③,，-20℃保存時(shí)不凍結(jié),，使用時(shí)無(wú)需解凍，從-20℃取出即可使用,；

④為了發(fā)揮藥效,，含藥培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用，如果加藥培養(yǎng)基未用完,，于4℃冰箱中避光保存,，2周內(nèi)用完，使用培養(yǎng)基前需預(yù)熱至37℃,；

⑤貼壁細(xì)胞換液或傳代前,，棄去舊的培養(yǎng)基，用含1000×支原體高效清除劑的PBS輕輕沖洗細(xì)胞表面2次,。懸浮細(xì)胞,、貼壁不牢的細(xì)胞,、半貼半懸細(xì)胞換液或傳代前,，可利用支原體直徑遠(yuǎn)小于細(xì)胞直徑的特點(diǎn)，采用150 g（或900 rpm）低速離心5mins,，棄去舊的培養(yǎng)基,，再用含1000×支原體高效清除劑的PBS輕輕沖洗細(xì)胞2次；

⑥用含藥PBS清洗細(xì)胞后,，加入含有支原體高效清除試劑的新鮮培養(yǎng)基（傳代后鋪細(xì)胞需更換為新的瓶/板）,，1天換液1次， 連續(xù)加藥4~7天,，或者2天換液1次,，連續(xù)加藥7~14天，若細(xì)胞污染非常嚴(yán)重時(shí),，需增加換液頻率和延長(zhǎng)處理時(shí)間,；

⑦若細(xì)胞污染嚴(yán)重，且需要快速清除支原體時(shí),，即可采用高濃度藥物（500×~1000×）進(jìn)行清除,，傳代后，為了防止藥物影響細(xì)胞貼壁，建議待大部分細(xì)胞貼壁后再加入藥物,，即先用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，鋪瓶，0.5~2h后在培養(yǎng)基中加入對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)的支原體高效清除劑,，輕輕混勻,，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

⑧在添加了本試劑的細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)1~2周后,，推薦使用支原體PCR檢測(cè)試劑盒（貨號(hào): MD01-001）判斷是否還存在支原體污染,。

⑨本試劑可以有效抑制或去除多種支原體，但并不能確?？梢匀コ龑?shí)際實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中遇到的任何類(lèi)型的支原體,。由于細(xì)胞可能會(huì)污染多種支原體，如遇污染極其特殊的支原體類(lèi)型,，可先用支原體高效清除劑處理1~2周后,，使用支原體清除試劑Plus進(jìn)行后續(xù)1~2周的支原體清除處理，2~3周后即可清除全部支原體,。

⑩如遇個(gè)別細(xì)胞對(duì)本試劑敏感,，細(xì)胞生長(zhǎng)速度明顯受影響時(shí)，建議減量使用或進(jìn)行稀釋度測(cè)試,；

?支原體高效清除劑處理后,，會(huì)有很好的預(yù)防和清除效果，但是如果環(huán)境或使用試劑中仍有污染源存在,，細(xì)胞可能會(huì)再次污染,，因此需做好適當(dāng)?shù)念A(yù)防措施
?加入本產(chǎn)品進(jìn)行支原體預(yù)防和清除時(shí)，無(wú)需添加雙抗（青霉素-鏈霉素）,；

?為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；

?本產(chǎn)品僅供研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,，不得用于診斷或治療,。