轉染細胞的方法有很多,，這里介紹一種比較經(jīng)濟實用的轉染試劑--聚乙烯亞胺(即PEI)。PEI（polyethylenimine）是一種帶有高電荷陽離子的多聚物,，非常容易結合帶負電荷的DNA分子，形成復合物,，并轉染到貼壁和懸浮細胞中,，常用于大規(guī)模瞬時轉染表達。在HEK293和CHO等細胞中轉染效率較高,。那么如何利用PEI轉染細胞呢,？
實驗前準備：
PEI (polysciences, Cat#:24765-1),將PEI配置成1ug/ml，用0.2μm濾膜過濾,，并分裝儲存于負80度,。
實驗步驟（以轉染293T為例）：
1.在六孔板中鋪10萬個細胞，在二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育過夜。
2.在100ul DMEM中加入2ug目的質粒,。如果是10cm皿可以加入5ug質粒,。
3.加入10ul PEI，立即混勻,。室溫孵育10min,。
4.然后再補加600ul DMEM培養(yǎng)基。
5.吸掉六孔板中的培養(yǎng)基,，然后將700ul混合液慢慢加入到細胞中,，輕輕搖晃混勻。
6.在二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育3小時,，然后加入2ml wan全培養(yǎng)基（DMEM+10%FBS）,。
7.培養(yǎng)箱中孵育48小時，進行下一步實驗,。
本期內容：如何利用PEI轉染細胞呢,？
下期內容：怎么選擇瞬時轉染和穩(wěn)定轉染呢？
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