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Anti-c-Myc 磁珠 | Anti-c-Myc Magnetic Beads (1 μm) | (MCE)

閱讀:116      發(fā)布時間:2024-7-17
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Anti-c-Myc 磁珠

MCE 國際站:Anti-c-Myc Magnetic Beads (1 μm)

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲條件:4°C 2 年

簡介:MCE Anti-c-Myc Magnetic Beads (1 μm) 用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統(tǒng)中 c-Myc 標記蛋白的免疫沉淀(IP)實驗,。

概述:MCE Anti-c-Myc Magnetic Beads 由高質(zhì)量的鼠源 IgG1 單克隆抗體與氨基磁珠共價偶聯(lián)制備,具有較高的 c-Myc 標簽融合蛋白加載容量 (>1 mg蛋白/mL),,可用于細菌和哺乳動物細胞裂解物以及體外表達系統(tǒng)中 c-Myc 標記蛋白的免疫沉淀 (IP) 實驗,。本產(chǎn)品可以通過磁力架 (MCE 產(chǎn)品目錄號:HY-K0200)或自動分離儀器分離,實驗便捷有效,。本產(chǎn)品蛋白荷載量高,,特異性強,也可用于免疫共沉淀 (Co-IP) 和小量的蛋白質(zhì)純化實驗,。

描述:

抗c-Myc磁珠(1μm)是基于氨基磁珠,,粒徑為1μm,與高質(zhì)量鼠IgG1單克隆抗體共價偶聯(lián),,該抗體可識別源自人c-Myc蛋白的c-Myc表位標簽(EQKLISEEDL),。


免疫沉淀過程中,僅需少量磁珠,,非特異性結合率低,。


•   方便省時。

•   非特異性結合率低,。

•   樣品損失極少,。

•   蛋白結合能力高達1mg/mL。

•   穩(wěn)定,,一瓶解決方案,。


操作說明:1. 磁珠預處理混懸 Anti-c-Myc Magnetic Beads,,取 20 μL 磁珠,置于 1.5 mL EP 管中,,加入 500 μL 洗滌緩沖液,,充分混懸,置于磁力架上磁性分離,,棄上清,。重復以上洗滌步驟 2 次。2. 樣品的結合在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 細胞裂解液,,充分混懸,,置于翻轉(zhuǎn)混合儀孵育,室溫孵育 2 小時或者 4°C 條件下孵育過夜,。置于磁力架上磁性分離,,棄上清。注意:結合過程中,,磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀,,屬于正常現(xiàn)象,,不會影響實驗結,。3. 洗滌在上述分離得到的磁珠中加入 500 μL 洗滌緩沖液,充分混懸磁珠,,磁性分離,,棄上清。重復以上洗滌步驟 3 次,,直到洗滌后的上清液中 OD280 小于0.05 為止,。注意:如上清液的 OD280 大于 0.05,適當增加洗滌次數(shù)即可,。4. 洗脫本說明書提供三種 c-Myc 標簽蛋白洗脫方案,,操作者可以根據(jù)后期檢測的需要選擇不同的洗脫方案。a. 變性洗脫法:此方法洗脫的樣品適用于 SDS-PAGE 檢測,。步驟:分離磁珠,,棄上清,向磁珠中加入 50 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻,,95°C 加熱 5 分鐘,。分離磁珠,收集上清至新的 EP 管,,進行 SDS-PAGE 檢測,。b. 酸性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有生物活性,可用于后期功能分析。步驟:分離磁珠,,棄上清,,向磁珠中加入 50 μL 的洗脫緩沖液 A 混合均勻,室溫孵育 10 分鐘,。分離磁珠,,收集上清至新的 EP 管,按每 50 μL 洗脫液加入 25 μL 中和緩沖液的比例加入中和緩沖液,,將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性,,樣品用于后期功能分析。c. 競爭性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有生物活性,,可用于后期功能分析,。步驟:分離磁珠,棄上清,,向磁珠中加入 3-5 倍磁珠體積的洗脫緩沖液 B混合均勻,,室溫孵育 1 小時或者 4°C 條件下孵育 1-2 小時。分離磁珠,,收集上清至新的 EP 管,,即為目的蛋白,樣品用于后期功能分析,。

注意事項:1. 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8,禁止凍結,。2. 本產(chǎn)品應避免離心,、干燥或凍存,禁止長時間置于磁場,,可能會引起磁珠聚團,,抗體結合后操作過程應輕柔,避免抗體脫落,。3. 使用本產(chǎn)品進行 IP 實驗前,,需先確認樣品中 c-Myc 融合蛋白的表達情況。4. 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解,,請配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails (MCE 產(chǎn)品目錄號:HY-K0010,,HY-K0011)。5. 不要使用含有 dithiothreitol (DTT) 的細胞裂解液樣品,,DTT 可能會引起磁珠上的 c-Myc 抗體脫落,。6. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品,。7. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作

常見問題:1. 檢測結果條帶背景過高?A. 可能是由于蛋白蛋白非特異性結合到抗體,、磁珠或 EP 管上,,建議對裂解液進行預處理,去除非特異結合的蛋白,;在最后一次洗滌前,,轉(zhuǎn)移整個樣品到新的 EP 管中,然后磁性分離或離心分離,。B. 洗滌效果不佳,,也會導致條帶較高的背景,建議增加洗滌時間與次數(shù),。2. 檢測結果無條帶,?A. c-Myc 標簽蛋白沒有表達可能導致檢測結果無條帶,建議操作:a. 確保目的蛋白帶有 c-Myc 標簽,;b. 制備新鮮的裂解液,;c. 使用恰當?shù)牡鞍酌敢种苿?(如 MCE 的產(chǎn)品:HY-K0010,HY-K0011),。B. 孵育時間不足可能導致檢測結果無條帶,,建議延長孵育時間。C. 裂解液中存在高濃度的 DTT或其他的還原劑等干擾物質(zhì),,建議選用合適的裂解液

銷售產(chǎn)品:Tirzepatide  | Hoechst 33342  | Acetaminophen  | Spermidine  | ISRIB (trans-isomer)  | Iptacopan (hydrochloride)  | 6-Diazo-5-oxo-L-nor-Leucine  | NAI-N3  | PNU-159682  | Abatacept

Trending products:Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Dye Reagents  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds




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