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當(dāng)前位置:上海科博瑞生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>上??撇┤鹕飪龃娴脑?xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng)
上海科博瑞生物凍存的原代細(xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng),,我司以客戶為核心,,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù),,原代細(xì)胞通過不斷改進(jìn)來提高效率,,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。
原代細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué),、基因組學(xué),、細(xì)胞株(系)研究、DNA,,RNA和遺傳學(xué)研究等,。
一、凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)
1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,,注意保護(hù)手和眼睛,。
2.將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),,直到管內(nèi)物體*融化,。
3.將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境,。
4.用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精,。
5.打開蓋子,,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,,開蓋時(shí)可能會有少量溢出,,這是正常現(xiàn)象),。
6.用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶,。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。
7.蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻,。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。
8.將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中,。
9.放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。
二,、原代細(xì)胞的組織塊培養(yǎng)法:
1.組織塊接種后的前3天,,在觀察和移動(dòng)的過程中,注意不要引起液體的振蕩,。要避免經(jīng)常翻動(dòng)和振動(dòng),,否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。
2.加入的培養(yǎng)液不宜過多,,避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來,。
3.當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細(xì)胞的生長。
4.為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上,,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上,。
我司致力于提供生命科學(xué)領(lǐng)域的服務(wù),提供原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)服務(wù),,為廣大科研工作者大大節(jié)省了重復(fù)勞動(dòng)的時(shí)間和精力,,,讓客戶買的放心,,用的安心,。
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