目錄:天津益元利康生物科技有限公司>>產(chǎn)品>>試劑盒>> 小鼠B細(xì)胞分離試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | up to1X10^9,、 5X10^8、1X10^8細(xì)胞 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | SN4001 | 主要用途 | 科研 |
一,、產(chǎn)品簡介
小鼠B細(xì)胞分離試劑盒 #SN4001
本試劑盒采用陰選的方式,，通過無柱磁極分離小鼠脾臟中的B細(xì)胞。分離過程中抗體和磁珠不會接觸B細(xì)胞,，能夠最大限度保持B細(xì)胞最原始的狀態(tài),。
• 操作簡便
• 無需烈紅
• 純度最高可達(dá)99%
• 18-20分鐘完成分離
試劑盒通過生WU素偶聯(lián)的抗體標(biāo)記非B細(xì)胞，再將細(xì)胞和鏈霉親和素納米磁珠孵育偶聯(lián),，然后通過磁極進(jìn)行無柱分離,。目標(biāo)細(xì)胞只需倒入一個新的管中即可分離，分離后的細(xì)胞可立即用于后續(xù)應(yīng)用,，如流式細(xì)胞術(shù),、細(xì)胞培養(yǎng)和功能實驗等。
二,、產(chǎn)品詳情
1. 目錄表
EasylsoTM mouse CD19 B cell isolation kits（陰選,，大包裝） | SN4001L | up to 1X10^9細(xì)胞 |
EasylsoTM mouse CD19 B cell isolation kits（陰選，中包裝） | SN4001M | up to 5X10^8細(xì)胞 |
EasylsoTM mouse CD19 B cell isolation kits（陰選,，小包裝） | SN4001S | up to 1X10^8細(xì)胞 |
2. 試劑盒組分
產(chǎn)品名稱 | 存儲條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
EasyIso ™ Mouse CD16/CD32 Blocker | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 封閉FcR受體，降低抗體非特異性結(jié)合 |
EasyIso ™ Mouse B Cell Isolation Cocktail | 4°C保存,，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 識別非 B細(xì)胞抗體混合液,，標(biāo)記非目的細(xì)胞 |
EasyIso ™ Streptavidin Nanobeads | 4°C保存，避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠結(jié)合非 B細(xì)胞,，通過磁極去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
運輸條件： 4°C運輸
三,、設(shè)備和試劑要求
緩沖液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
耗材：70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)；無菌離心管
儀器：離心機(jī),，磁力架
溫馨提示
小鼠脾臟研磨后采用70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)過濾即可用于分離,，無需采用紅細(xì)胞裂解液
采用FACS Buffer而不是PBS進(jìn)行操作，能夠提高細(xì)胞得率
確保FACS Buffer滲透壓穩(wěn)定,，免疫細(xì)胞較為敏感
確保每一步無菌操作,，謹(jǐn)防污染
四、操作步驟
步驟 | 說明 | 劑量和時間 |
1 | 準(zhǔn)備脾臟單細(xì)胞懸液至指定濃度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso ™ Mouse CD16/CD32 Blocker | 100 μL/mL |
3 | 加入EasyIso™ Mouse B Cell Isolation Cocktail至樣品中 | 100 μL/mL |
4 | 抗體和細(xì)胞孵育 | 常溫孵育10 min |
5 | 震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads | 混勻30 s |
6 | 加Streptavidin Nanobeads至樣品中 | 100 μL/mL |
7 | 輕柔混勻磁珠和細(xì)胞,，孵育 | 常溫孵育5 min |
8 | 加入FACS Buffer到樣品中,，輕輕混勻 | 總體積加入至2.5 mL （5 mL流式管） 總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管) |
9 | 樣品置于磁力架上,，使磁珠吸附 | 單孔磁力架吸附（3 min） 聯(lián)排磁力架吸附（5 min） |
10 | 傾斜磁力架，將樣品倒入新的收集管中,，收集樣品 | 細(xì)胞分離成功 |
五,、數(shù)據(jù)
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如圖：小鼠脾臟 B 細(xì)胞的分離。（A）分離C57BL/6背景小鼠的脾臟,，磨碎后采用70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)過濾后,，進(jìn)行CD45和CD19染色，CD45+CD19+比例約23%,。（B）采用（#SN4001）分離B細(xì)胞,，分選后的CD45+CD19+細(xì)胞純度高達(dá)95.7%。
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天津益元利康生物科技有限公司,，成立于2018年,，坐落于天津經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療,、免疫學(xué),、分子生物學(xué)、 細(xì)胞生物學(xué)等多個方向,，專注于生命科學(xué)試劑,、耗材、細(xì)胞,、儀器等產(chǎn)品銷售,，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma,、Qiagen,、EZBioscience、ZYMO Research,、MedKoo,、Abcam、Elabscience,、GeneTex,、Gentaur、immunostar、Invitrogen,、invivogen,、Kerafast、等等,。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品,、及時到位的服務(wù)，努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商,。
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