目錄:天津益元利康生物科技有限公司>>產(chǎn)品>>試劑盒>> 小鼠CD8 T細(xì)胞分離試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | up to1X10^9,、 5X10^8,、1X10^8細(xì)胞 |
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貨號 | SN4103 | 主要用途 | 科研 |
一、產(chǎn)品簡介
二,、產(chǎn)品目錄表
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits(陰選,,大包裝) | SN4103L | up to 1X10^9細(xì)胞 |
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits(陰選,,中包裝) | SN4103M | up to 5X10^8細(xì)胞 |
EasylsoTM mouse CD8 T cell isolation kits(陰選,小包裝) | SN4103S | up to 1X10^8細(xì)胞 |
三,、試劑盒組分
產(chǎn)品名稱 | 存儲條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
EasyIso™ Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail | 4°C保存,,避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 識別非CD8 T細(xì)胞抗體混合液,標(biāo)記非目的細(xì)胞 |
EasyIso ™ Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,,避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠結(jié)合非CD8 T細(xì)胞,,通過磁極去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
運輸條件: 4°C運輸
設(shè)備和試劑要求
· 緩沖液:FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
· 耗材:70 μm無菌尼龍濾網(wǎng);無菌離心管
· 儀器:離心機,,磁力架
溫馨提示
· 脾臟樣本無需裂紅處理
· 采用FACS Buffer而不是PBS進(jìn)行操作,,能夠提高細(xì)胞得率
· 確保FACS Buffer滲透壓穩(wěn)定,免疫細(xì)胞較為敏感
· 確保每一步無菌操作,,謹(jǐn)防污染
四,、操作步驟
步驟 | 說明 | 劑量和時間 |
1 | 準(zhǔn)備脾臟單細(xì)胞懸液至指定濃度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso™ Mouse CD8 T Cell Isolation Cocktail至樣品中 | 100 μL/mL |
3 | 抗體和細(xì)胞孵育 | 常溫孵育10 min |
4 | 震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads | 混勻30 s |
5 | 加Streptavidin Nanobeads至樣品中 | 100 μL/mL |
6 | 輕柔混勻磁珠和細(xì)胞,,孵育 | 常溫孵育5 min |
7 | 加入FACS Buffer到樣品中,,輕輕混勻 | 總體積加入至2.5 mL (5 mL流式管) 總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管) |
8 | 樣品置于磁力架上,使磁珠吸附 | 單孔磁力架吸附(3 min) 聯(lián)排磁力架吸附(5 min) |
9 | 傾斜磁力架,,將樣品倒入新的收集管中,,收集樣品 | 細(xì)胞分離成功 |
五、數(shù)據(jù)展示
如圖:小鼠脾臟CD3 T 細(xì)胞的分離,。(A)分離C57BL/6背景小鼠的脾臟,,磨碎后采用70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)過濾后,進(jìn)行CD8和CD3染色,,CD3+CD8+比例約11.1%,。(B)采用(#SN4103)分離CD8 T細(xì)胞,分選后的CD3+CD8+細(xì)胞純度高達(dá)94%,。
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