一,、病毒滴度
病毒的滴度:單位體積(通常為mL)液體中具有生物活性的病毒顆粒數(shù),。滴度是一個(gè)病毒自身復(fù)制的數(shù)量概念,可分為物理滴度和感染滴度,。物理滴度是指包含病毒基因組的病毒顆粒的濃度,,可以通過通過定量PCR對病毒顆粒的基因組拷貝數(shù)進(jìn)行檢測,也可以通過測定病毒顆粒中的特定蛋白進(jìn)行定量,,但物理滴度未考慮到病毒活性和感染效率,,因此是不準(zhǔn)確的。感染滴度是指成功轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的病毒顆粒的濃度,,須通過細(xì)胞感染實(shí)驗(yàn)來測定,,如利用定量PCR對細(xì)胞中的病毒基因拷貝數(shù)進(jìn)行檢測,或通過攜帶熒光的病毒感染細(xì)胞,,利用熒光細(xì)胞數(shù)計(jì)算病毒滴度,。
二、常見的病毒滴度單位
最小致死量(MLD):指在一定時(shí)間內(nèi)能使試驗(yàn)動(dòng)物全部死亡的最小病毒量,。
最小感染量(MID):指在一定時(shí)間內(nèi)能使試驗(yàn)動(dòng)物全部發(fā)病的最小病毒量,。
半數(shù)致死量(LD50):指在一定時(shí)間內(nèi)能使半數(shù)試驗(yàn)動(dòng)物死亡的病毒量,這是zui常用的病毒滴度單位,。
半數(shù)感染量(ID50):當(dāng)以感染發(fā)病作指標(biāo)時(shí),,則用半數(shù)感染量來測定,例如半數(shù)雞胚半數(shù)致死量(ELD50)或半數(shù)組織細(xì)胞培養(yǎng)物感染量(TCID50),。
PFU/mL(空斑形成單位每毫升):代表單位體積的病毒形成的空斑數(shù),,常用于腺病毒載體的滴度標(biāo)定,屬于功能單位,。
TU/mL(轉(zhuǎn)導(dǎo)單位每毫升):單位體積中成功轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的病毒數(shù)量,,常用于慢病毒載體的滴度測定,屬于功能單位,。
IU/mL(整合單位每毫升):單位體積中成功轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞并整合至細(xì)胞基因組的病毒數(shù)量,,常用于慢病毒載體的滴度測定,屬于功能單位,。
GC/mL(基因組拷貝每毫升):單位體積中病毒載體的基因組數(shù)量,,常用于腺相關(guān)病毒載體的滴度測定,,屬于物理單位,。
VG/mL(病毒顆粒數(shù)每毫升):單位體積中病毒顆粒數(shù),可用于腺病毒載體的滴度測定,,屬于物理單位,。
VP/mL(病毒粒子數(shù)每毫升):單位體積中病毒粒子的數(shù)量,屬于物理單位,。
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