上次我們分享了IHC未染色或無(wú)信號(hào)的原因分析,，這次讓我們來(lái)看看IHC染色不均勻是為什么吧,。
一、組織切片制備
解釋：組織切片薄厚不均勻
→建議：更換刀片
二,、組織固定
1.解釋：酒精固定不足會(huì)產(chǎn)生偽影,；
→建議：延長(zhǎng)固定時(shí)間；嘗試不同的固定液
2.解釋：固定延遲導(dǎo)致抗原擴(kuò)散,；
建議：立即固定組織,；可以考慮使用交聯(lián)固定劑
三、脫蠟
解釋：脫蠟不wan全
→建議：使用新鮮的二甲苯
四,、抗體兼容性
解釋：一抗可能結(jié)合其他抗原上的表位
→建議：從多抗切換至單抗,；嘗試不同的單抗
五、透化
解釋：細(xì)胞膜被破壞,，膜蛋白丟失
→建議：使用低濃度或更溫和(Tween-20)的透化試劑
六,、組織切片狀態(tài)
解釋：組織切片未保持濕潤(rùn)
→建議：在染色階段避免組織切片干燥
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