細胞消化的方法有哪些？
我們的細胞在培養(yǎng)時大部分會以貼壁的形式生長,，它們在機體內時,，也是與其他細胞或者細胞外基質結合的。細胞培養(yǎng)過程中使用的wan全培養(yǎng)基中的血清,，含有許多帶陽性電荷的促細胞附著因子(層黏連蛋白 Laminine,、纖維連接蛋白 Fibronectin 等胞外基質），能幫助細胞附著于帶陰性電荷的底物上,，并形成連接,、貼壁伸展。使細胞解除這種附著,，就是細胞消化,。那么你知道細胞消化的方法有哪些嗎？讓我們一起來看看吧,！
一,、機械消化法
直接用培養(yǎng)基吹打或使用細胞刮刀，通過外力使細胞解除貼壁狀態(tài),，一般用于不需要繼續(xù)培養(yǎng)的細胞,，相較于其他方法，機械消化法無法量化控制,，細胞分散效果差,，且會造成大量細胞破損，影響細胞傳代狀態(tài),。
二,、離子螯合法
細胞膜表面蛋白大多需要鈣、酶離子來維持與胞外基質的穩(wěn)定鍵結,，當然也包含各種粘附蛋白（如：整合素,、鈣黏著蛋白、橋粒等）,，螯合劑會在不破壞細胞膜表面蛋白的狀況下,，抽離這些離子，使粘附蛋白失活而減少細胞-細胞間及細胞-底物間的連接作用,，使細胞容易與培養(yǎng)底物分離,。
0.02% EDTA是常用的離子螯合劑,，在37℃效果最jia（消化敏感的細胞可在4℃作用），適用于消化一般貼壁性細胞或細胞表面標記實驗細胞,。
但EDTA無法用血清終止其反應,，所以在消化細胞后必須用緩沖鹽溶液（如：PBS）清洗離心，以免影響后續(xù)細胞貼壁效果,。
三,、酶消化法
用蛋白水解酶消化連接細胞及培養(yǎng)底物的蛋白質，適用于消化貼壁性稍強的細胞,。上述實驗方法中最常見的還是胰酶消化,。大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，但是我們發(fā)現(xiàn)吸去胰蛋白酶后,，殘留的那些附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2分鐘足夠消化細胞（絕大部分1分鐘不到）,。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代,，對細胞傷害很大,。簡單的程序是先采用PBS潤洗細胞吸去，胰酶潤洗吸去,，然后37℃消化細胞,。
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