三羥甲基氨基甲烷（Tris）是一種應(yīng)用非常廣泛的有機試劑,。它及其衍生物被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液的制備,，可用于制作藥物、有機合成,、生物緩沖劑等,。其中在生化實驗中，許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實驗都需要用Tris作為生物緩沖劑,。那么你知道該如何選擇緩沖溶液嗎,？讓我們一起來看看吧！
TBS即Tris緩沖鹽水,，是Tris-HCl緩沖鹽溶液,，為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液。因為Tris堿的堿性較強,，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液,；對生物化學(xué)過程干擾很小,，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,。
但是緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,，溫度效應(yīng)也大，而且易吸收空氣中的CO2,，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封,，此緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極,。
TBST緩沖液 TBST中含有Tris-HCl,，NaCl，tween20這三種物質(zhì),，是做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液,。目的是洗掉非特異性吸附的蛋白質(zhì)，并且維持一個接近的天然環(huán)境,。其中,，Tween是一種離子表面活性劑，可加速抗體非特異性結(jié)合的分離,。因為Western Blotting中所用的膜可以與蛋白質(zhì)結(jié)合,，孵育過程中，抗體能夠與膜非特異性結(jié)合,。為了防止以后曝光造成膠片背景太高,，在孵育抗體后，混有Tween 20的TBS 能夠?qū)⒎翘禺愋越Y(jié)合的抗體洗掉,，增加特異性,。
TE緩沖液 Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液"，TE緩沖液是弱堿性,，對DNA的堿基有保護性,，因此，DNA在TE中的穩(wěn)定性較好,，不易被破壞完整性或產(chǎn)生開環(huán)及斷裂,，TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。
將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,，則獲得“TAE緩沖液"（Tris/Acetate/EDTA）,，TAE是使用zui廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量,，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率也較快,，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果。此外,，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進行電泳,。但是,，TAE的缺點是緩沖容量小，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換,，否則長時間電泳是不可選用的,。
TBE緩沖液 丙烯酰胺實驗以及瓊脂糖凝膠電泳將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成硼酸則獲得“TBE緩沖液"（Tris/Borate/EDTA）。TBE Buffer是分子實驗中常用的緩沖液,，由Tris和硼酸、EDTA組成,，所以簡稱為TBE buffer,。該緩沖液常用于聚電泳實驗中。TBE Buffer為無色澄清液體,，可在室溫中儲存,，25℃時的pH值為8.2~8.4。在使用時要注意的是TBE Buffer中不能含有DNA水解酶和RNA水解酶的活性,。
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