DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟,,裂解是破壞樣品細胞結(jié)構(gòu),從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程,,純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過程,。那么該如何選擇DNA提取方法呢,?讓我們一起來看看吧!
一,、酚氯仿抽提法
酚氯仿抽提是去除蛋白質(zhì)的有效手段,,但如果蛋白質(zhì)含量超過了其飽和度,裂解體系中的蛋白質(zhì)就不會被一次性去除,,需要進行多次反復抽提,,而每次的抽提均會導致核酸的損失。酚氯仿抽提的優(yōu)勢是成本低廉,,對實驗條件要求較低,。二、高鹽沉淀法
高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一個變種,,其省略了酚氯仿抽提操作的麻煩,,并且克服了酚氯仿抽提方法的缺點,只是得到DNA的純度不夠穩(wěn)定,。
三,、柱式法
過柱法利用某些固相介質(zhì),在某些特定的條件下,,選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質(zhì)及鹽的特點,,實現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離,是目前試劑盒提取廣泛使用的方法,。
離心柱法DNA提取它的優(yōu)點是比傳統(tǒng)的酚氯法提取的純度高,,有利于RNA保護,而且能進行微量操作,,以其低廉的價格和相對便捷的操作,,漸逐取代了傳統(tǒng)DNA提取方法,被高??蒲兴仁袌銎毡榻邮?。
四、磁珠法
該方法將純化介質(zhì)包被在納米級的磁珠表面,,通過介質(zhì)對DNA的吸附,,在外加磁場的作用下使DNA附著于磁珠并定向移動,從而達到核酸與其它物質(zhì)分離的目的,。磁珠法的優(yōu)勢是高質(zhì)量,、高通量滿足如今對核酸提取效率的需求;靈敏度高(只需微量的樣本),;分離速度快(磁場分離只需幾秒鐘),;
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