日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

乙醇含量測定試劑盒說明書

　　　微量法100管/96樣

注　意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

酒是含酒精（乙醇）飲料的統(tǒng)稱,，乙醇是酒的主要成分，是衡量酒質(zhì)量的重要指標(biāo)之一,。我國是世界上Z早發(fā)明釀酒的國家,，也是酒類產(chǎn)品消費(fèi)大國，其消費(fèi)量居世界zhi首,。因此,，快速,、準(zhǔn)確測定酒中乙醇含量，對于確保酒的質(zhì)量和保護(hù)消費(fèi)者的健康具有重大意義,。

測定原理：

乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,，同時，NAD 被還原生成 NADH,，NADH 在 1-mPMS 的作用下使 WST-8 顯橙黃色,，通過 450 nm 下測定吸光值變化可測得乙醇含量。

需自備的儀器和用品：

酶標(biāo)儀,、臺式離心機(jī),、可調(diào)式移液器、96 孔板,、研缽,、冰、蒸餾水,。

試劑的組成和配制：

試劑一：液體 12 mL×1 瓶,4℃保存,；

試劑二：粉劑×1 瓶, -20℃保存；臨用前加入 6 mL 試劑三充分溶解待用,，用不完的試劑分裝后-20℃保存,；

試劑三：液體 10 mL×1 瓶,4℃保存；

試劑四：液體 1.5mL×1 管,， 4℃避光保存,。

乙醇提取：

1.    組織：按照組織質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 蒸餾水）,，進(jìn)行勻漿，8000g,，25℃離心 10min,，取上清待測。

2.   細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個）：蒸餾水體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 蒸餾水），超聲波破碎（冰浴,，功率 20％或 200W,，超聲 3s，間隔 10s,，重復(fù) 30 次）,， 8000g，25℃離心 10min，取上清待測,。

3.   血清（漿）等液體樣品：直接測定,。

測定步驟：

1.   酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 450nm,。

2.   工作液的配制：臨用前按照樣本數(shù)量,，按以下比例配制工作液

試劑名稱                                       體積（μL）

試劑一                                                 100

試劑二                                                   50

試劑四                                                   10

3.   樣本測定

按下表在 96 孔板中加入如下試劑

試劑名稱                                       體積（μL）

樣本                                                    40

測定工作液                                              160

混勻后記錄 450nm 下測定初始吸光值 A1，和 37℃避光孵育 10min 后的吸光值 A2,，計算△A=A2-A1,。

乙醇含量計算：

x 為乙醇含量（μmol/mL）,，y 為吸光值差值△A,。

1.   按照血清（漿）體積計算

乙醇含量（μmol/mL）= (△A-0.0055)÷0.0256

=39.1×(△A-0.0055)

2.   按照樣品質(zhì)量計算

乙醇含量（μmol/g 鮮重）= [ (△A-0.0055)÷0.0256×V1]÷(W ×V1÷V2）

=  39.1×(△A-0.0055)÷W

3.   按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計算

乙醇含量（μmol/10⁴ cell）= [ (△A-0.0055)÷0.0256×V1]÷（500×V1÷V2）

=0.078×(△A-0.0055)

V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.04mL,；V2：加入提取液體積，1 mL,； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500 萬,；

注意事項(xiàng)：

測定前取 1-2 個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),，若△A﹥0.3 或乙醇含量﹥10μmol/mL，需將樣本用蒸餾水稀釋后再測定,，以確保測定的準(zhǔn)確性,。

Z低檢測限：0.02μmol/mL。

乙醇含量測定試劑盒僅供科研,！