皖儀科技離子色譜法測定乳粉中的膽堿含量
膽堿由 Adolph Strecker 于1849年從豬膽汁中分離得到,,故又名膽素,,直至上世紀三十年代才逐步明確其營養(yǎng)價值和作用。膽堿在人體的生產(chǎn)發(fā)育過程中起著至關(guān)重要的作用,,研究表明,,膽堿對于大腦的發(fā)育及代謝、神經(jīng)系統(tǒng)信息傳遞,、視力的增強以及鈣的代謝等功能均有積極的促進和改善效能,。此外膽堿能夠影響胎兒的大腦發(fā)育,,增強寶寶的記憶力,,對神經(jīng)管的閉合起到關(guān)鍵作用;缺乏膽堿可能會導致記憶力損傷,、腎臟損害,、干細胞受損及引起心腦血管疾病。膽堿在食品領(lǐng)域主要應(yīng)用于在嬰幼兒配方食品和孕婦妊娠期及哺乳期食品中,,是嬰幼兒配方食品中必須添加的一種營養(yǎng)物質(zhì),。人體內(nèi)膽堿的主要源自于自身合成和食物獲取,一般不會出現(xiàn)膽堿缺乏,,但對于嬰幼兒來說,,其自身合成膽堿的能力有限,特別是在母乳不足的情況下,,其機體所需膽堿的來源主要是嬰幼兒配方食品,,故對嬰幼兒配方食品中膽堿含量的監(jiān)測具有重要意義,。
國內(nèi)目前關(guān)于奶粉中的膽堿含量檢測方法的報道較少。傳統(tǒng)方法主要有高氯酸非水滴定法,、雷氏鹽重量法等,;現(xiàn)代膽堿含量的檢測方法有離子色譜法、雷氏鹽比色法,、高壓液相色譜-電化學檢測法,、化學發(fā)光法等。膽堿是堿性強度與氫氧化鈉相似的一種含氮的有機堿性化合物,,在水溶液中可以完全電離,。所以可以采用離子色譜法,用陽離子交換柱測定膽堿的含量,。該方法線性良好,,重復性穩(wěn)定,適合奶粉中膽堿含量的日常檢測,。
1 實驗方法
1.1測試條件
儀器:IC6200系列離子色譜儀配置陽離子抑制器,;
色譜柱:陽離子色譜柱(4.0*250mm);
保護柱:皖儀諾譜;MS-5CG(4.0mm*30mm),;
柱溫:30℃,;流速:1.0mL/min;
進樣量:100μL,;
檢測器:電導檢測器,。
1.2 使用試劑
淋洗液:15mmol/L甲烷磺酸溶液;
標樣:膽堿標準工作溶液(100mg/L),;
樣品:羊奶粉,。
1.3 標樣制備
1.3.1 膽堿標準曲線溶液配制分別精密移取0.2mL、0.5mL,、1.0mL,、2.5mL、5.0mL膽堿標準工作溶液,,置于5個100mL容量瓶中,,用15mmol/L的甲烷磺酸溶液定容至標線,混勻,,即得,。
1.3.2 樣品溶液配制精密稱取適量樣品于比色管中,水浴酸水解,;稀釋適當倍數(shù),,過C18柱和濾膜,即得。
2 測試結(jié)果
2.1 線性測試
2.1.1 膽堿線性測試標準曲線系列濃度見表1,。
按照1.1的測試條件進行測試,,得到標準曲線譜圖多點重疊譜圖如圖1。
圖1
膽堿在該色譜條件下標準曲線線性相關(guān)系數(shù)R2大于0.999,,線性良好,,膽堿線性方程如下圖2。
圖2
2.2 檢出限測試
配制0.02mg/L的標準溶液,,按照“1.1"項色譜條件,,注入該濃度標準溶液進樣分析,標準譜圖見圖3,。檢出限數(shù)據(jù)見表2,。
圖3
2.3 樣品測試
按照“1.1"項色譜條件,連續(xù)注入數(shù)針樣品溶液進樣分析,,重復性譜圖見圖4,。重復性數(shù)據(jù)見表3。
圖4
3 總結(jié)
本次建立的離子色譜法檢測乳粉中的膽堿,,線性良好,,重復性穩(wěn)定,靈敏度高,,滿足測試需求,,可供參考。
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