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深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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YAC 克隆的分析實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)庫 參考來源:

時(shí)間:2021/12/24閱讀:1116
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材料與儀器


酵母菌
AHC YPD 甘油
培養(yǎng)箱 冷凍管


步驟


1.  用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上,,倒扣平板于30℃培養(yǎng),,直至長出1~3 mm 大小的紅色菌落為止。

2.  短期保存:用Parafilm膜將平板周圍封起來,,于4℃可保存4~6周,。

3.  長期保存:接種一個(gè)單獨(dú)的YAC克隆的菌落于3.2 ml YPD培養(yǎng)基中,在30℃搖床過夜,,然后加入1 ml 80%甘油,,混勻,再分成0.2~1.0  ml 小份將甘油/菌懸液移至冷凍管中,-80℃保存,。


同實(shí)驗(yàn)其他方法

制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

1.  接種一個(gè)紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培養(yǎng)基的250 ml 三角燒瓶中,,在旋轉(zhuǎn)搖床上30℃ 250 r/min 振蕩培養(yǎng)24 h。   2.  擴(kuò)大

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