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經(jīng)濟(jì)快捷的SNP位點(diǎn)研究方法-SNP基因分型

時間:2021/10/11閱讀:1461
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SNP,,全稱 Single Nucleotide Polymorphisms,是指在基因組上單個核苷酸的變異。目前很多人仍然使用測序法來進(jìn)行研究,,具有準(zhǔn)確,、直觀的優(yōu)點(diǎn)。但有一種方法,,能間接的研究SNP,,且經(jīng)濟(jì)快捷,那就是——SNP基因分型,。


其實(shí)現(xiàn)原理:熔解溫度(melting temperature,Tm)是指吸光值增加到最大值的一半時的溫度稱為DNA的解鏈溫度或熔點(diǎn),。當(dāng)實(shí)時熒光定量PCR中的熒光探針與靶基因錯配,即靶基因序列上產(chǎn)生了核苷酸變異,,他們的熔解溫度比較低,。相對而言,沒有突變的靶基因與探針雜交的熔解溫度較高,。通過區(qū)分熔解溫度的差異,,來區(qū)分突變型和未突變型(野生型)。


進(jìn)行SNP基因分型需要注意:

1,、將突變的位點(diǎn)放在探針中間,。

2、保證兩條探針的熔解溫度相同,。


熒光探針中,,Taqman探針可進(jìn)行SNP基因分型。推薦Applied Biosystems公司的Taqman MGB探針,,相對普通Taqman探針,,與錯配序列的熔解溫度相差更大。


分子信標(biāo)也可用于SNP基因分型,。他的莖環(huán)結(jié)構(gòu)比一般線性的分子探針更適合SNP分型,,莖環(huán)結(jié)構(gòu)與錯配序列雜交的熱穩(wěn)定性更低,熔解溫度相差也更大,。


讀者們可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求,,選擇合適的方法進(jìn)行分析。


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