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當(dāng)前位置：深圳市安培生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>共轉(zhuǎn)化,，篩選轉(zhuǎn)染細(xì)胞的實用工具
想要達(dá)到轉(zhuǎn)染的目的,，即分析轉(zhuǎn)染基因的功能和表達(dá),，需要轉(zhuǎn)染的基因穩(wěn)定整合進(jìn)入宿主染色體。
根據(jù)細(xì)胞類型,，細(xì)胞群體中,，最高有80%的細(xì)胞，以瞬時表達(dá)的方式表達(dá)轉(zhuǎn)染的基因。但對于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,，好的情況,，也只有1/1000的成功率——細(xì)胞能穩(wěn)定表達(dá)轉(zhuǎn)染的基因。
所以,，我們需要通過篩選活的新表型（標(biāo)記）的細(xì)胞,，來分離穩(wěn)定轉(zhuǎn)染體。方法是將標(biāo)記的基因和待轉(zhuǎn)染的基因進(jìn)行重組,、連接,，共同轉(zhuǎn)染到細(xì)胞核內(nèi)。這種物理上沒有關(guān)聯(lián)的基因整合成1個序列,，并在同一轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的這種現(xiàn)象,，叫做共轉(zhuǎn)化。
那么,，篩選具體是如何進(jìn)行的呢,？
一般情況下，這個標(biāo)記是某種編碼抗生素抗性的基因,，和待轉(zhuǎn)染基因一起在細(xì)胞上表達(dá),，如第一個在哺乳動物細(xì)胞上廣泛使用的篩選基因，編碼胸苷激酶（TK）的病毒基因,。
待轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系,，是不含TK的哺乳動物細(xì)胞系，在轉(zhuǎn)染成功后,，才會變成含TK的細(xì)胞系,，才能在氨基嘌呤存在的培養(yǎng)基中生存。
因此,，共轉(zhuǎn)化是一個篩選細(xì)胞的實用方法,。
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