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脂質(zhì)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染為什么是首先選的轉(zhuǎn)染方法,?

時間:2021/10/9閱讀:1969
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在細胞轉(zhuǎn)染實驗中,,我們常常要根據(jù)不同的實驗?zāi)康模D(zhuǎn)染細胞的不同,,選擇我們將要使用的實驗方法,。


脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染是我們的首先選擇,他具有易操作,,重復(fù)性好,,低毒性和適用于懸浮培養(yǎng)體系細胞的特點,,在很多轉(zhuǎn)染方法效率低的情況下,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法效果很好,。


其中,,脂質(zhì)介導(dǎo)轉(zhuǎn)染試劑的典型,非脂質(zhì)體型FuGENE6和陽離子脂質(zhì)體Lipofectamine2000能夠在有血清的干擾下成功轉(zhuǎn)染細胞,,減少轉(zhuǎn)染的操作步驟,。


脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染的原理主要是通過靜電作用,將帶有負電荷的DNA與陽離子脂質(zhì)結(jié)合,,形成脂質(zhì)-DNA復(fù)合體,。這樣的復(fù)合體較為穩(wěn)定,能夠延緩核酸酶的降解作用,。


脂質(zhì)-DNA復(fù)合體通過細胞膜的融合,,或細胞的內(nèi)吞作用,進入到細胞中,。


脂質(zhì)介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染除了基因片段,,還可以運載大質(zhì)粒。除了瞬時轉(zhuǎn)染,,也可以用于建立穩(wěn)定表達的細胞系,。


因此,在其他轉(zhuǎn)染方法效率低的情況下,,可以使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法,。針對原代細胞或分化細胞,或者轉(zhuǎn)染大質(zhì)粒等高分子質(zhì)量DNA時,,也推薦使用脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染,。


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