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常用的卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)及細(xì)胞表達(dá)

時間:2021/10/9閱讀:4612
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整理一篇關(guān)于卵巢癌細(xì)胞的培養(yǎng)方法和細(xì)胞的特征特點(diǎn),,由于卵巢癌早期缺少癥狀,,即使有癥狀也不特異,,篩查的作用又有限,,因此早期診斷比較困難,就診時60%~70%已為晚期,,而晚期病例又療效不佳,,卵巢癌方向的研究也成為了目前基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究重點(diǎn),下面我們分享部分我們實(shí)驗(yàn)室有的卵巢細(xì)胞株的培養(yǎng)方法和特征,。       

部分細(xì)胞形態(tài)

image.png

CELL Name:NIH OVCAR

image.png

Cell Name:SK-OV-3



細(xì)胞系
形態(tài)特征培養(yǎng)基
其他
ID8小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞單層,,貼壁生長

90%DMEM高糖(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A 雙抗(SD0038)

DMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0101);

氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。溫度:37攝氏度,。

在C57BL/6小鼠體內(nèi),可導(dǎo)致腹腔腫瘤和腹水的形成,;常被用作卵巢癌的同基因小鼠模型

caov-3

人,;卵巢腺癌細(xì)胞

來源于卵巢組織;上皮細(xì)胞樣

90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0200)+SP(SD0008)+G/A (SD0038)

DMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0125)

氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。溫度:37攝氏度

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)


Caov-4

人,;腺癌

來源于轉(zhuǎn)移部位:輸卵管的漿膜下層;上皮細(xì)胞,;貼壁Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入20%胎牛血清FBS

CHO

倉鼠,;卵巢細(xì)胞


90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

*培養(yǎng)基:F12K*培養(yǎng)基(貨號:MD0401)

氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。溫度:37攝氏度。

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)


CHO-K1

倉鼠,;卵巢細(xì)胞亞株

來源于卵巢組織,;上皮細(xì)胞

90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

*培養(yǎng)基:F12K*培養(yǎng)基(貨號:MD0401)

氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。溫度:37攝氏度,。

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液 (SD0002)


CHO/dhFr-

倉鼠;卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷

來源于正常卵巢組織,;上皮細(xì)胞IMDM培養(yǎng)基加入10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清FBS,;添加0.1mM次黃嘌(漂)呤,0.016mM胸腺嘧啶,,100nM氨甲喋呤,。該細(xì)胞為二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞。  在沒有HT(次黃嘌(漂)呤-胸腺嘧啶)時細(xì)胞會死亡,。細(xì)胞培液中加氨甲喋呤可以防止對藥物低抗性的回變細(xì)胞的生長,。
CTLA4 Ig-24倉鼠;卵巢細(xì)胞來源于卵巢組織,;上皮細(xì)胞

90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

DMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0101)

氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。溫度:37攝氏度。

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)


ES-2

人,;卵巢透明細(xì)胞癌

來源于低分化卵巢透明細(xì)胞癌組織,;成纖維細(xì)胞;貼壁,;致癌

90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

*培養(yǎng)基:McCOY's5A*培養(yǎng)基(貨號:MD0901)

氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。溫度:37攝氏度。

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

在裸鼠中成瘤,。該細(xì)胞對多種化療藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現(xiàn)出低到中等的耐受性,。ES-2細(xì)胞表達(dá)低水平的P糖蛋白,。

HEY

人;III期卵巢乳頭狀囊腺癌

來源于子房組織,;上皮細(xì)胞,;貼壁;致癌

90%1640基礎(chǔ)(MD0200) +10%FBS(SD0100)+1%GA(SD0038)  

*培養(yǎng)基鏈接:1640*培養(yǎng)基(MD0201)


氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。溫度:37攝氏度,。

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

HEY細(xì)胞系對烷基化劑順二胺二氯鉑(II)(順鉑)表現(xiàn)出一定程度的抗性

HO-8910

人;卵巢癌細(xì)胞

來源于卵巢癌病人腹水中,;上皮細(xì)胞樣RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),,加入10%胎牛血清。轉(zhuǎn)移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致,。
HO-8910PM人,;高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞
RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清,。

Lec1

倉鼠,;卵巢細(xì)胞

來源于卵巢組織;上皮細(xì)胞

90%αMEM(MD0804)+10%胎牛血清(SD0100)+肌醇 43.2mg/L(SD0014)+葉酸 8.82mg/L(SD0016)+β-巰基乙醇 7.8mg/L(SD0031)+G/A (SD0038)

*培養(yǎng)基:αMEM*培養(yǎng)基(貨號:MD0807)

氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。溫度:37攝氏度,。

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是從脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶,,從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體,。對于研究N-連接糖基化改變對內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響,,這些細(xì)胞十分有用,。

NIH:OVCAR-3

人;卵巢癌細(xì)胞

來源于卵巢腺癌病人惡性腹水,;上皮細(xì)胞,;貼壁;致癌

80%1640(MD0200)+20%胎牛血清(SD0200)+0.01 mg/ml牛胰島素(SD0020)+G/A (SD0038)

*培養(yǎng)基:1640*培養(yǎng)基(貨號:MD0220)

氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

與107細(xì)胞聯(lián)合皮下接種5只裸鼠21天后全部成瘤,。NIH-OVCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個合適的模型系統(tǒng)且由于存在激素受體,,這對于激素治療的評估或許是有用的。

OV-90

人,;3級,,IIIC期,惡性乳頭狀漿液性腺癌

來源于卵巢癌轉(zhuǎn)移部位:腹水,;上皮,;貼壁;致癌

42%MCDB 105+42%M 199(MD0950)+15%FBS(SD0200)+1%GA(SD0038)

*培養(yǎng)基:MCDB105/M199*培養(yǎng)基(MD1203)

氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。溫度:37攝氏度,。

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

致病基因:her2/neu +, p53 (mutated,Ser--> Arg mutation at exon 6, codon   215) Ref

表達(dá)角蛋白基因

SK-OV-3

人;卵巢癌細(xì)胞

來源于卵巢腺癌,,腹水轉(zhuǎn)移,;上皮細(xì)胞

90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

*培養(yǎng)基:McCOY's5A*培養(yǎng)基(貨號:MD0901)

氣相:空氣,95%,;二氧化碳,5%,。溫度:37攝氏度,。

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

此細(xì)胞對腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受,,

SW 626

人,;III期腺癌

來源于子房組織;上皮細(xì)胞,;貼壁;致癌Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入10%胎牛血清FBS

TOV-21G

人;3級,,III期,,原發(fā)性惡性腺癌; 透明細(xì)胞癌

來源于:子房;上皮細(xì)胞,;貼壁,;致癌含有1.5g / L碳酸氫鈉的MCDB105培養(yǎng)基和含有2.2g / L碳酸氫鈉的199培養(yǎng)基以1:1混合。再加入15%胎牛血清FBS

致病基因:p53 +(野生型)

表達(dá)角蛋白基因

UACC-1598

人,;4級囊腺癌

來源于子房組織,;上皮細(xì)胞樣;貼壁Leibovitz的L-15培養(yǎng)基加入轉(zhuǎn)鐵蛋白0.01 mg / ml;0.01 mg / ml胰島素,;5μg/ mL(55 U / ml)過氧化氫酶,;3.6μg/ mL(0.01 mM)氫化可(啲)的松;70μg/ mL(0.5mM)鄰磷酸乙醇胺,;10 ng / ml人重組表皮生長因子(EGF),;3 ng / ml(0.01μM)雌二醇;0.8 ng / ml(1 pM)Na-L-甲狀腺素,;額外的2 mM谷氨酰胺和5%胎牛血清FBS

受體表達(dá):低表達(dá)表皮細(xì)胞生長因子受體

致病基因:表達(dá)N-myc,, 真核翻譯起始因子5A2(eIF-5A2);低表達(dá)c-erbB2; 不表達(dá)ras

表達(dá)基因:不表達(dá)細(xì)胞角蛋白(MAK-6),,黃體酮,,ras;低表達(dá)c-erbB2,;表達(dá)N-myc,, 真核翻譯起始因子5A2(eIF-5A2)。

UWB1.289

人,;卵巢癌

上皮細(xì)胞樣,;貼壁

50%的RPMI-1640培養(yǎng)基和50%的MEGM(來自Clonetics / Lonza的乳腺上皮生長培養(yǎng)基(MEGM Bullet   Kit; CC-3150)由MEBM基礎(chǔ)培養(yǎng)基和SingleQuot添加劑制成(ATCC不使用慶大霉素 - 兩性霉素B)。加入3%胎牛血清FBS

注意:不要過濾*培養(yǎng)基,。

表達(dá)致病基因:p53

表達(dá)抗體:表達(dá)細(xì)胞角蛋白7(CK-7),,鈣網(wǎng)膜蛋白,Wilms的腫瘤蛋白(WT),;不表達(dá)BRCA1

表達(dá)受體:不表達(dá)雌激素和黃體酮

UACC-2727上皮樣,,貼壁

90%L-15(MD1100)+5%FBS(SD0200)+0.01 mg/ml transferrin+0.01 mg/ml insulin+5 µg/mL (55 U/ml) catalase+3.6 µg/mL (0.01 mM) hydrocortisone+70 µg/mL (0.5mM) o-phosphoethanolamine+10 ng/ml human recombinant epidermal growth factor (EGF)+3 ng/ml (0.01 µM) estradiol +0.8 ng/ml (1 pM) Na-L-thyroxine+2 mM glutamine+G/A (SD0038)

定制*培養(yǎng)基:L-15*培養(yǎng)基(貨號:MD0000)

氣相:空氣,100%,;二氧化碳,,0%。溫度:37攝氏度

凍存條件/Cryopreservation:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

*凍存液:無血清細(xì)胞凍存液(SD0002)

her2/neu(+),;EGFR(+),;N-myc(+)MAK-6(+)




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