細胞增殖是細胞在周期調(diào)控的因子下，通過DNA復制等反應,，完成細胞分裂的過程,。在細胞增殖中，新細胞的產(chǎn)生過程影響著體內(nèi)所有組織的發(fā)育,、生長和維持,，同時，它也被嚴格調(diào)控著,，以防失控的細胞分裂（可出現(xiàn)在各種癌癥）導致腫瘤的形成和器官功能的破壞,。正因為細胞增殖對生物活動的這種廣泛影響，其在各種環(huán)境中的準確評估變得十分重要,。

腫瘤細胞增殖和轉化過程

細胞增殖是通過細胞分裂引起的細胞數(shù)量增加,，在整個生命周期中對正常組織發(fā)育和維持是必須的,。一些類型的細胞會處于持續(xù)增殖狀態(tài)，如皮膚和骨髓細胞,，但許多成人組織中的細胞會處于非增殖狀態(tài),，只有在損傷或感染時，才能被激活來補充細胞,。與之相反,，細胞周期關鍵基因突變引起的細胞增殖失調(diào)是各類癌癥的標志，會造成腫瘤異常的不受控制的生長,。

增殖檢測一般用于分析分裂中的細胞數(shù)量的變化,，進而反應細胞的生長狀態(tài)及活性,，細胞增殖檢測是細胞分析和藥物研發(fā)中經(jīng)常會使用的手段。目前廣泛應用于腫瘤生物學,，分子生物學,，藥代動力學等領域。

細胞增殖檢測的方法

一類是直接法,，這種方法就是直接測定進行分裂的細胞數(shù)來評價細胞的增殖能力,，另一類是間接的方法，我們通過檢測細胞的活力來評價細胞的增殖能力,。

常見的細胞增殖檢測方法包含：直接計數(shù)法,；MTT檢測法；MTS檢測法,；CCK-8檢測法,；3H-TdR滲入法；Brdu/EdU檢測法,；CFSE檢測法,；刃天青還原法；活細胞蛋白酶底物法/ATP法等,。

常見檢測方法對比

其中,，MTT比色是一種目前被廣泛采用的檢測細胞生長和存活的方法,。

CCK-8試劑盒

CCK-8試劑盒全稱Cell Counting Kit-8，是一種基于WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒,。

CCK-8檢測細胞活性原理圖

其工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下,，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）,。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比,。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,，間接反映活細胞數(shù)量。

CCK-8被經(jīng)常用于藥物篩選,、細胞增殖測定,、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗等,。

優(yōu)點：

· 酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾,；

· 靈敏度高，可以測定較低細胞密度,；

· 細胞毒性非常低,，因此加入WST-8顯色后,，可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)從而找到最佳測定時間；

· 檢測時間短,；

· 重復性優(yōu)于MTT法,；

· 操作簡單，省時省力,，省去了洗滌細胞,，適合批量樣品檢測；

· 檢測試劑很穩(wěn)定,。

安培生物推薦ZETA LIFE的CCK-8試劑盒

細胞增殖及毒性檢測CCK試劑盒系列貨號規(guī)格：

產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格
K009-100	CCK	100tests
K009-500	CCK	500tests
K009-1000	CCK	1000tests
K009-3000	CCK	3000tests
K010-100	Cell Counting Sensitive Kit	100tests
K010-500	Cell Counting Sensitive Kit	500tests
K010-1000	Cell Counting Sensitive Kit	1000tests
K010-3000	Cell Counting Sensitive Kit	3000tests

CCK-8,，細胞增殖檢測較為合適的選擇

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