很多老師在設(shè)計科研實驗的時候都會很迷茫,，到底用什么細胞好,？越來越多的老師開始傾向于原代細胞的科研實驗,，在設(shè)計實驗中,，原代細胞和細胞株到底該怎么選擇呢？

原代細胞的定義：

原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞,、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此,，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞,，仍然保留二倍體數(shù),。但實際上，我們通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng),。

原代細胞因為可以模擬機體的功能,，主要用于：生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究,、癌癥藥物的研究

下面我們整理了一些培養(yǎng)原代細胞的小知識：

細胞復蘇

原代細胞對解凍過程非常敏感,，因此將小瓶置于37℃水浴鍋中，保持并輕輕旋轉(zhuǎn)直到內(nèi)容物剛剛解凍是很重要的,。然后應(yīng)立即從水浴中取出小瓶,，并轉(zhuǎn)移到無菌操作臺。確保您的培養(yǎng)瓶在解凍前已經(jīng)準備就緒,，以便可以立即用于接種細胞,，并置于培養(yǎng)箱中,，使用cell systems的原代細胞時，復蘇的時候不建議離心,，第二天換個液就可以,。

細胞傳代

原代細胞有間隙抑制接觸不良反應(yīng)，所以細胞不能到達100%的密度的時候傳代,，一般*的建議觀察細胞的生長周期,，Cell Systems的原代細胞在細胞密度達到85%左右的時候傳代最佳，當生長至100％匯合時,，它就會衰老,。記住，所有的原代細胞不是100％純,，因此我們要盡量減少污染細胞的生長,。當細胞傳代時，使用低濃度的胰蛋白酶,，也可以嘗試下cellsystems的整體消化套裝哦（品牌：cell systems,，貨號：4Z0-800）并在顯微鏡下密切監(jiān)測細胞。此外,，記得在胰蛋白酶消化后*中和細胞中的胰酶,，因為任何活性的胰蛋白酶都將損傷細胞。

細胞凍存

通常我們不推薦重新凍存原代細胞,，因為這可以促進細胞衰老和/或?qū)е鹿δ茏兓?。原代細胞非常敏感，重新凍結(jié)可能導致細胞死亡或損傷,。

與細胞系不同,，原代細胞增殖有限，我們建議盡早使用原代細胞進行實驗以防止遺傳漂移,，如果你正在使用一個增殖困難的細胞類型,，你應(yīng)該密切監(jiān)測細胞形態(tài)，因為少量混雜的細胞（如成纖維細胞）可能隨著時間的推移,，大量生長從而成為主要細胞,。

正常的原代細胞培養(yǎng)，在無污染的情況下,，建議培養(yǎng)基中不加抗體,，抗體會影響細胞的某些基因變異從而導致實驗數(shù)據(jù)有差異，所以cell systems的細胞在分離提取時就考慮到這點,，他們不會采用任何抗體去分離和純化的同時,，通過酶消化或者離心洗滌的方法讓細胞達到95%以上的純度，這樣得到的實驗數(shù)據(jù)更為準確,。