1.可轉(zhuǎn)染極度難轉(zhuǎn)染的免疫細胞，懸浮細胞,，如T細胞,，NK細胞、人淋巴細胞,、THP-1等;

2.可高效率轉(zhuǎn)染sirRNA,、小分子到任何哺乳動物細胞；

3.轉(zhuǎn)染細胞后可10小時內(nèi)快速代謝的第三代新轉(zhuǎn)染試劑;

轉(zhuǎn)染條件：

細胞密度：60左右

質(zhì)粒DNA濃度：648ng/ul

質(zhì)粒DNA大小：10646bp

培養(yǎng)板：6孔板

轉(zhuǎn)染試劑用量：8ul

質(zhì)粒DNA用量：電訊

轉(zhuǎn)染試劑：AD600150,，Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑

轉(zhuǎn)染時間：48小時

血清：z7010-500 胎牛血清

細胞凍存：CE70100T無血清細胞凍存液

細胞活力檢測：K009-500,，cck8

重要指導方針：

-質(zhì)粒DNA必須溶解在ddH 2 O中。如果溶解在Buffer中,，轉(zhuǎn)染效率會下降70%,，甚至導致轉(zhuǎn)染失敗。

-質(zhì)粒DNA必須去內(nèi)毒素,，否則轉(zhuǎn)染效率會下降70%,，甚至導致轉(zhuǎn)染失敗。

- 在制備轉(zhuǎn)染復合物時,，不能使用其他試劑稀釋核酸或轉(zhuǎn)染試劑,。只需將核酸和轉(zhuǎn)染試劑按照1:1的關系直接混合即可。否則,，轉(zhuǎn)染效率將下降80%,，甚至導致轉(zhuǎn)染失敗。

-檢查并與轉(zhuǎn)染試劑混合后,，用移液管吹吸10-15次以充分混合,，確保管壁無液體殘留。

- 將核酸與轉(zhuǎn)染試劑混合并在室溫下孵育至少 10-15 分鐘,。

- 將復合物加入細胞培養(yǎng)板并輕輕混勻,，將板置于 CO 2 培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。

- 在整個轉(zhuǎn)染實驗過程中,，細胞可以在*培養(yǎng)基中培養(yǎng),，而不是使用無血清培養(yǎng)基。

- 如果轉(zhuǎn)染后顯微鏡下觀察到白色或黑色圓形顆粒,，則為轉(zhuǎn)染試劑的新材料顆粒,。