PriCells: 正常大鼠小膠質(zhì)細胞的培養(yǎng)                                                                                        

實驗材料：
1. 新生大鼠或小鼠,；
2. 不含Ca²⁺和Mg²⁺的1×PBS,，添加200000IU/L青霉素,、200mg/L鏈霉素，pH7.2,；
3. 培養(yǎng)用液：含10%的胎牛血清的MEM培養(yǎng)液,，補加5μg/ml牛胰島素,、2%葡萄糖及抗生素；
4. CFS-Ⅰ刺激因子：小膠質(zhì)細胞在體外培養(yǎng)條件下一般不分裂,，加入星形膠質(zhì)細胞所產(chǎn)生的活性物質(zhì)或單核巨噬細胞系體外存活,、增值和分化特異的某些生長因子如CFS后可在體外增值；
5. 培養(yǎng)器具：眼科剪,、眼科鑷等,；

實驗方法：
1. 切取新生大鼠大腦皮質(zhì)等灰質(zhì)組織，經(jīng)剪碎,、胰蛋白酶消化,，制成分離的細胞懸液，培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)兩周左右,。制備混合的膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)物,；
2. 37℃恒溫搖床上以150r/min搖動處理膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)物2h；
3. 收集培養(yǎng)瓶中搖晃下來的細胞懸液,，將其種植到未用生長基質(zhì)成分包被的塑料培養(yǎng)皿內(nèi)進行短期培養(yǎng),；
4. 棄去未貼壁的漂浮細胞及懸液。已在培養(yǎng)皿上貼壁的細胞即為小膠質(zhì)細胞,；
5. 將所獲得的小膠質(zhì)細胞調(diào)制成細胞密度為2×105個/ml的細胞懸液,；
6. 將細胞懸液種植到培養(yǎng)瓶、皿內(nèi),，繼續(xù)培養(yǎng),。屆時在培養(yǎng)液中加入10%粗制CFS或者25U/ml的純CFS。一周換液兩次,；