PriCells: 標(biāo)記的鏈霉卵白素-生物素法(LSAB)                                 

標(biāo)記的鏈霉卵白素-生物素法(LSAB法)是標(biāo)記的卵白素技術(shù),，20世紀(jì)80年代開(kāi)始采用,。

基本試劑：
① 第一抗體,；
② 生物素化第二抗體；
③ 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉卵白素,。

實(shí)驗(yàn)方法：
1. 將固定后的標(biāo)本用PBS漂洗,；
2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min，用來(lái)密封內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,；
3. TBS漂洗3次,，每次1min；
4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min,；
5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內(nèi)過(guò)夜,；
6. TBS漂洗3次，每次1min,；
7. 滴加二抗后于室溫放置30min,；
8. 將標(biāo)本于生物素化的第二抗體在室溫孵育10min；
9. TBS沖洗3次,，每次1min,；
10. 再與稀釋的LSAB在室溫孵育10min；
11. 重復(fù)步驟9,；
12. 用DAB或AEC顯色,；
13. 用蒸餾水反復(fù)沖洗；
14. 用蘇木精復(fù)染,；
15. 封片,；