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PriCells: 免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)中的雙PAP法檢測(cè)微量抗原
PriCells: 免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)中的雙PAP法檢測(cè)微量抗原
在復(fù)合物體系中連接更多的PAP復(fù)合物,來進(jìn)一步放大抗原,從而使靈敏度更為增強(qiáng),,適用于檢測(cè)微量抗原,。
實(shí)驗(yàn)方法:
1. 將固定后的標(biāo)本用PBS漂洗,;
2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,,用來密封內(nèi)源性過氧化物酶;
3. PBS漂洗2次,,每次3min,;
4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min;
5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內(nèi)過夜,;
6. PBS漂洗3次,,每次3min;
7. 滴加二抗后于室溫放置30min,;
8. 重復(fù)步驟6,;
9. 加PAP復(fù)合物,室溫60min,;
10. 重復(fù)步驟6,;
11. 第二次滴加酶標(biāo)二抗;
12. 用PBS液反復(fù)漂洗,;
13. 第二次加PAP復(fù)合物,;
14. 重復(fù)步驟12,;
15. 將標(biāo)本置于0.04%DAB+0.03%H2O2的溶液中顯色5~10min,;
16. 用蘇木精復(fù)染后封片,鏡檢,;