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PriCells: 正常滑膜細(xì)胞原代培養(yǎng)
PriCells: 正?；ぜ?xì)胞原代培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)材料：
1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠,、兔，人手術(shù)切除的關(guān)節(jié)等,；
2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,，添加100IU/ml青霉素,、100μg/ml鏈霉素，pH7.2,；
3. 培養(yǎng)液：RPMI1640培養(yǎng)基,，補(bǔ)加15%小牛血清；
實(shí)驗(yàn)方法：
1. 將大鼠處死后,，用75%酒精消毒,；
2. 用手術(shù)剪剖開其四肢皮膚與肌肉，暴露長(zhǎng)骨兩端的關(guān)節(jié),，取出關(guān)節(jié)面滑膜組織置于盛有緩沖液的培養(yǎng)皿中,；
3. 剔除滑膜組織外層結(jié)構(gòu)及周邊軟骨組織，用緩沖液洗2—3次,；
4. 將滑膜組織置于盛有少量小牛血清的培養(yǎng)皿中,，剪碎成1mm×1mm×1mm大小的植塊；
5. 將制備的植塊接種到螺旋口培養(yǎng)瓶中,。反轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,，使植有組織塊的一面朝上，加入培養(yǎng)液,，蓋好瓶蓋,。將培養(yǎng)瓶放入含5%CO2的培養(yǎng)箱中在37℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)；
6. 培養(yǎng)4h后,，組織塊較牢黏附于瓶底時(shí),，再輕輕反轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，繼續(xù)培養(yǎng),；
7. 培養(yǎng)3d后換培養(yǎng)液,；
PriCells提供：
1. 各種原代細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
2. 各種原代細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑,；
3. 原代細(xì)胞分離試劑盒,；
4. 原代細(xì)胞鑒定試劑盒；
5. 原代細(xì)胞總蛋白質(zhì)抽提物,；
6. 原代細(xì)胞總RNA,；
7. 原代細(xì)胞總DNA；