PriCells: 正常小鼠原代破骨細胞培養(yǎng)方案

實驗材料：

1. 正常小鼠乳鼠顱蓋骨組織,；

2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,，添加200000IU/L青霉素,、200mg/L鏈霉素,，pH7.2,；

3. 0.1%Ⅰ型膠原酶,；

4. 培養(yǎng)器具：培養(yǎng)瓶或皿（用多聚賴氨酸包被）,、200目不銹鋼網(wǎng)篩,、眼科剪、鑷子等,；

培養(yǎng)方法：

1. 選用出生1-3天小鼠乳鼠,，處死，放入75%酒精中浸泡2—3分鐘,，轉(zhuǎn)至超凈工作臺內(nèi),，取顱蓋骨；

2. 將組織放入含有1×PBS（pH7.2）中沖洗3次,；

3. 用眼科剪將顱蓋骨剪成1×1mm3大小組織塊,，轉(zhuǎn)至15ml離心管內(nèi)，加入0.1%Ⅰ型膠原酶,，37℃水浴消化90min,；

4. 加入含血清的培養(yǎng)基，終止酶反應,；

5. 將消化后的組織過200目網(wǎng)篩,，收集濾液于15ml離心管中，1000rpm/min離心10min,，棄去上清,，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞,；

6. 調(diào)整細胞密度以合適的密度接種入培養(yǎng)瓶,，放置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。待細胞長滿瓶皿的生長表面即可傳代,；

7. PriCells-原代骨細胞細胞特制基礎培養(yǎng)基；

8. PriCells-原代骨細胞細胞培養(yǎng)特制添加劑

9. PriCells-原代細胞分離試劑盒,；

10. PriCells-原代細胞鑒定試劑盒,；