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原代細(xì)胞計數(shù)技術(shù)
1,、準(zhǔn)備計數(shù)板:用酒精清潔計數(shù)板及專用蓋玻片,,然后輕輕拭干。
2,、制備細(xì)胞懸液:用消化液分散單層培養(yǎng)細(xì)胞或直接收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,,制成單個細(xì)胞懸液。要求細(xì)胞密度不低于104/ml,,若細(xì)胞數(shù)很少,,應(yīng)將懸液離心(1000rpm,2分鐘),,重懸浮于少量培養(yǎng)液中,。
3、加樣:用習(xí)慣輕吹打細(xì)胞懸液,,取少許細(xì)胞懸液,在計數(shù)板上蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,。
4,、計數(shù):計算計數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞只計左側(cè)和上方的,。然后按下式計算:
細(xì)胞數(shù)/ml=4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000,。